[发明专利]纯品多糖制备寡糖的方法有效
申请号: | 202010966207.X | 申请日: | 2020-09-15 |
公开(公告)号: | CN112094955B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 夏峥 | 申请(专利权)人: | 淄博职业学院 |
主分类号: | C07H3/06 | 分类号: | C07H3/06;C13K13/00 |
代理公司: | 淄博市众朗知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 37316 | 代理人: | 吕明哲 |
地址: | 255314 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纯品 多糖 制备 寡糖 方法 | ||
1.一种纯品多糖制备寡糖的方法,其特征在于:由以下步骤组成:
(1)将从红曲霉发酵液中提取得到的纯品多糖溶于酸性溶液中,控制纯品多糖溶液浓度为1-3%,分装于多个EP小管中,然后分别在不同温度的水中进行降解;
(2)反应结束后,除去酸性溶液,加水进行溶解,然后加入无水乙醇醇沉,离心收集上清部分,浓缩烘干,制备得到粗寡糖;
(3)采用凝胶柱层析法对粗寡糖混合物进行分离纯化,收集后检测糖含量,作洗脱曲线图,收集各个主峰部分浓缩烘干,制备得到寡糖;
其中:
步骤(1)中所述的酸性溶液为硫酸、盐酸或三氟乙酸中的一种,浓度为0.01mol/L或0.05mol/L;
步骤(1)中降解温度为70℃-90℃,降解时间为2-4h;
步骤(3)中凝胶柱层析法所采用的凝胶柱为Bio-Gel P-4,流动相为0.2mol/L的 (NH4)2CO3溶液,流速为0.1mL/min;
步骤(3)中寡糖中的单糖的确定是以十种单糖标准品为标准,利用PMP柱前衍生HPLC法对寡糖样品进行单糖组成测定,包括寡糖的完全酸水解、降解后寡糖的PMP衍生和高效液相色谱分析。
2.根据权利要求1所述的纯品多糖制备寡糖的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的纯品多糖为经过纯化后糖含量达98%以上,经凝胶渗透色谱检测只有单一对称峰的纯品多糖。
3.根据权利要求1所述的纯品多糖制备寡糖的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的EP小管的个数为60-100个。
4.根据权利要求1所述的纯品多糖制备寡糖的方法,其特征在于:步骤(2)中水的加入量为样品体积的3-5倍,加入无水乙醇的量为样品溶解后的水溶液体积的10-15倍。
5.根据权利要求1所述的纯品多糖制备寡糖的方法,其特征在于:步骤(2)中离心转速为3000-4000 r/min,离心时间10-15 min。
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