[发明专利]一种基因组磁珠提取试剂盒和提取方法

权利要求书

1.一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：裂解液、蛋白酶K、异丙醇、羟基磁珠、洗涤液和洗脱液；

所述裂解液的配方为：25～75mM且pH7.5～8.5的Tris-HCL，3～5M的异硫氰酸胍，5～15％的聚多卡醇，5～15％的PEG8000；

所述洗涤液包括A液和B液，所述A液为：120～130mmol/l NaCl，体积浓度80～90％无水乙醇；所述B液为：25～35mmol/l Tris，体积浓度80～90％无水乙醇；

所述洗脱液的配方为：9.5～10.5mM Tris-HCl；0.8～1.2mM EDTA。

2.根据权利要求1所述的一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液的配方为：50mM且pH8.0的Tris-HCL，4M的异硫氰酸胍，10％的聚多卡醇，10％的PEG8000。

3.根据权利要求1所述的一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液包括A液和B液，所述A液为：125mmol/l NaCl，体积浓度85％无水乙醇；所述B液为：30mmol/lTris，体积浓度85％无水乙醇。

4.根据权利要求1所述的一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述洗脱液的配方为：10mM Tris-HCl；1mM EDTA。

5.根据权利要求1所述的一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述蛋白酶K的浓度为20～60mg/ml。

6.根据权利要求1所述的一种基因组磁珠提取试剂盒，其特征在于，所述异丙醇的浓度为200～400ul/ml。

7.一种利用权利要求1-6任一所述试剂盒提取基因组的方法，其特征在于，所述方法包括：

将待检测的样品加入蛋白酶K、裂解液、异丙醇混匀，再加入羟基磁珠混匀，获得混合液；

将所述混合液进行磁性分离，取沉淀，获得第一磁珠；

将所述第一磁珠加入洗涤液A液，磁性分离后倒掉上清液，后加入洗涤液B液，磁性分离后倒掉上清液，获得第二磁珠；

将所述第二磁珠干燥后，加入洗脱液进行洗脱，磁性分离后，获得上清液，即为提取的基因组。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶K、裂解液、异丙醇和羟基磁珠的体积比为2：(48-52)：(33-37)：2。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述加入羟基磁珠混匀采用涡旋震荡混匀的方式。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述洗脱时，在60～70℃下加热5～10min；所述磁性分离时，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清。