[发明专利]一种评价药物预防病毒性肺炎效果的方法

说明书

本发明涉及药物评价与筛选的技术领域，针对现有评价肺炎的动物模型存在造模操作复杂，不利于后续肺炎治疗药物的评价与筛选工作，公开了一种肺炎动物模型的建立方法合理用该模型的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，该肺炎动物模型通过将5dpf的斑马鱼置于水中培养，并向斑马鱼注射肺炎诱导剂poly(I:C)，给药浓度为≥50 ng/尾建立，在评价药物时采用炎症消退作用、巨噬细胞改善作用和相关基因RNA相对表达量作用评价指标。本发明的肺炎模型可用于评价已知药物的毒性或功效，还可用于筛选具有未知药物，能准确反映药物在体内的真实情况，可实现在体内高通量筛选或评价药物对病毒性肺炎的治疗功效，具有可靠、快速、高效、低廉、高性价比等优点。

技术领域

本发明涉及药物评价与筛选的技术领域，具体涉及一种评价药物预防病毒性肺炎效果的方法。

背景技术

在非细菌性肺炎中，病毒性肺炎占25％-50％，常为吸入性感染，主要传染源是病人，通过飞沫和密切接触传染，可由上呼吸道病毒感染向下蔓延引起，也可继发于出疹性病毒感染，常伴气管-支气管感染，多发生于冬春季节，可散发或流行，多见于婴幼儿、老年人和原有慢性心肺疾病的病人。其中流行性感冒病毒是成年人和老人病毒性肺炎最为常见的病原，婴幼儿病毒性肺炎则常由呼吸道合胞病毒感染所致。其他如副流感病毒、巨细胞病毒、冠状病毒、腺病毒、鼻病毒和某些肠道病毒，如柯萨奇、埃可病毒等也可引起病毒性肺炎。近年来由于免疫抑制药物广泛应用于器官移植病人，以及爱滋病发病人数的增多，病毒性肺炎的发病率逐渐增多，而冠状病毒肺炎的爆发使得预防病毒性肺炎显得尤为重要。目前肺炎的治疗主要有：通气供氧、选用抗生素、糖皮质激素、外源性肺表面活性物质、血管扩张剂、相关酶等。但现有的肺炎治疗药物存在着或疗效不佳，或毒副作用较大或费用高等问题，因此开发新的肺炎治疗药物显得非常必要。

药物筛选是发现、开发药物过程中一个重要的环节，实验肺炎模型的建立对评价与筛选肺炎治疗药物至关重要。目前肺炎动物模型主要被用来研究肺炎的机制，但这些动物模型大多数是根据已知的诱发肺炎的危险因子复制的，例如脓毒血症、继发于骨折的脂肪栓塞、吸入酸性物质、肺或末端血管床的缺血-再灌注以及其他的临床危险因素。而且理想的肺炎实验动物模型应能够复制人类肺炎发生的机制和后果，但是目前为止没有任何一个实验动物模型可以完全复制人类肺炎的所有特征，大多肺炎实验动物模型只是针对人类肺炎的单个或少数几个病理生理特征进行复制，如换气功能异常、肺顺应性下降、肺实质损伤和肺泡毛细血管膜通透性增加等，并且这些动物模型均存在造模操作复杂、技术要求高、手术创伤大、肺炎发生率低、并发症和死亡率高、模型建立不稳定、可重复性差等缺点，实验周期长、费用高、工作量大，不利于后续肺炎治疗药物的评价与筛选工作。其他如体外细胞模型缺少药物在生物整体的代谢转化和体内的循环分布，不能反映药物在体内的真实情况。因此建立一种能很好的模拟药物在体内的过程，又能快速方便的评价与筛选肺炎治疗药物的动物模型具有重要的应用价值。

发明内容

针对现有评价肺炎的动物模型存在造模操作复杂，不利于后续肺炎治疗药物的评价与筛选工作，本发明的目的在于提供一种肺炎动物模型的建立方法；

本发明的又一目的在于提供使用该肺炎动物模型来评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，可以快速、准确评价和筛选预防病毒性肺炎的药物。

本发明提供如下的技术方案：

一种肺炎动物模型的建立方法，将斑马鱼置于水中培养，并向斑马鱼注射肺炎诱导剂，所用肺炎诱导剂为poly(I：C)，所述肺炎诱导剂的给药浓度为≥50ng/尾。

作为本发明方法的优选，所用斑马鱼为受精后5天斑马鱼。