[发明专利]一种评价药物预防病毒性肺炎效果的方法

权利要求书

1.一种肺炎动物模型的建立方法，其特征在于，将斑马鱼置于水中培养，并向斑马鱼注射肺炎诱导剂，所用肺炎诱导剂为poly(I:C)，所述肺炎诱导剂的给药浓度为≥50 ng/尾；

所用斑马鱼为受精后5天斑马鱼。

2.一种评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，包括权利要求1所述的肺炎动物模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）设置正常对照组：将斑马鱼置于水中培养；

（2）设置模型对照组：将步骤（1）同规格的斑马鱼置于水中培养，并向斑马鱼注射肺炎诱导剂poly(I:C)，培养；

（3）设置供试品组：将步骤（1）同规格的斑马鱼置于水中培养，并向斑马鱼注射肺炎诱导剂poly(I:C)和待测试药物，培养；

（4）检测评价：取上述正常对照组、模型对照组和待测试药物组的斑马鱼进行检测，比较待测试药物组和模型对照组的评价指标，评价待测试药物预防病毒性肺炎的效果；

所述评价指标为炎症消退作用、巨噬细胞改善作用和TNF-α基因的RNA相对表达量、IL-1β基因的RNA相对表达量中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，所述评价指标为炎症消退作用时，所用斑马鱼为转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼。

4.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，所述水的pH值为6.9～7.2，总硬度为53.7～71.6 mg/L CaCO₃，每1 L反渗透水中加入200 mg速溶海盐，电导率为480～510 μS/cm。

5.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，所述炎症消退作用计算公式如下：

；

其中，S1(模型对照组)为模型对照组斑马鱼的鱼鳔部位的中性粒细胞个数统计值，S1(供试品组)为供试品组斑马鱼的鱼鳔部位的中性粒细胞个数统计值。

6.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，所述巨噬细胞改善作用计算公式如下：

；

其中，S2(模型对照组)为模型对照组斑马鱼的鱼鳔部位的巨噬细胞荧光强度统计值，S2(供试品组)为供试品组斑马鱼的鱼鳔部位的巨噬细胞荧光强度统计值。

7.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，TNF-α与IL-1β基因的RNA相对表达量的计算公式如下：

；

其中，表示目的基因TNF-α或IL-1β的扩增次数，表示内参基因β-actin的扩增次数，表示poly(I:C)的相对的扩增次数，表示目的基因相对于内参的扩增次数，表示供试品组相对于模型的相对扩增次数。

8.根据权利要求2所述的评价药物预防病毒性肺炎效果的方法，其特征在于，评价标准如下：

当供试品组的评价指标相对于模型对照组的显著性差异水平p0.05时，药物有明显预防病毒性肺炎效果，否则，药物不具有预防病毒性肺炎效果或预防效果不明显。