[发明专利]一种对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 202010882047.0 | 申请日： | 2020-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN112014338A | 公开（公告）日： | 2020-12-01 |
| 发明（设计）人： | 梁艳;赵畅;龚婷;吴年芬;舒芹;张雪娇;赵愿安 | 申请（专利权）人： | 武汉生之源生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 | 代理人： | 张晓冬 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 磷脂酶 活性 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2；其特征在于，所述试剂R1包含：缓冲液、加速剂、Proclin 300、抗坏血酸氧化酶、螯合剂和表面活性剂；所述试剂R2包含：缓冲液、甘油、对氧磷、叠氮钠、亚铁氰化钾和甜菜碱；
其中，所述螯合剂为EDTA-2K和/或EDTA-2Na；
所述表面活性剂选自Emulgen A90、Emulgen A60或Emulgen430中的一种或两种以上；
所述甜菜碱选自BS-12、BS-14、BS-18或 BB中的一种或两种以上。
2.根据权利要求1所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述螯合剂的质量浓度为0.1～0.5g/L。
3.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂的质量浓度为5～10g/L。
4.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述甜菜碱的质量浓度为5～20g/L。
5.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1的pH值为6～8；所述试剂R2的pH值为6～8。
6.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液选自Good′s缓冲液、Tris缓冲液或磷酸盐缓冲液中的一种或两种以上；
所述缓冲液的摩尔浓度为50～100mmol/L。
7.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述加速剂为氯化镁和/或氯化钾；
所述加速剂的质量浓度为5～10g/L。
8.根据权利要求1或2所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒，其特征在于，所述甘油的质量浓度为5～20g/L。
9.使用权利要求1至8中任一项所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒检测血清中对氧磷脂酶-1活性的方法，包括：
将待测血清和所述试剂R1混合均匀，在温度为37℃下保持5分钟，得到待测血清混合物；
向所述待测血清混合物中加入所述试剂R2，混合均匀，得到待测样品；
将所述待测样品在温度为37℃下孵育1min，测定所述待测样品的吸光度A1；后继续孵育3min，测定所述待测样品的吸光度A2；
根据所述吸光度A1和所述吸光度A2，计算得到血清中对氧磷脂酶-1的浓度；
其中，所述试剂R1和试剂R2的体积比为3:1。
10.根据权利要求1至8中任一项所述的对氧磷脂酶-1活性检测试剂盒以及权利要求9所述的方法在检测血清中对氧磷脂酶-1活性中的应用。
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