[发明专利]一种鉴别髭鲷未定种sp与横带髭鲷的DNA条形码及其鉴别方法和应用

权利要求书

1.一种鉴别髭鲷未定种sp与横带髭鲷的DNA条形码，其特征在于，所述髭鲷未定种sp的DNA条形码序列如SEQ ID No.1所示；所述横带髭鲷的DNA条形码序列如SEQ ID No.2所示。

2.扩增权利要求1所述的DNA条形码的引物，其特征在于，包括F296和R515；所述F296的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；所述R515的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

3.一种利用权利要求1所述的DNA条形码鉴别髭鲷未定种sp与横带髭鲷的方法，包括以下步骤：

1)提取待鉴别样本的基因组DNA获得待鉴别DNA；

2)以步骤1)中获得的待鉴别DNA为模板，以权利要求2所述的引物进行PCR扩增获得扩增产物；

3)将所述扩增产物的序列与DNA条形码进行比对；如果所述扩增产物的序列和髭鲷未定种sp的DNA条形码一致，则待鉴别样本为髭鲷未定种sp；如果所述扩增产物的序列和横带髭鲷的DNA条形码一致，则待鉴别样本为横带髭鲷。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述PCR扩增的扩增体系以25.15μL计，包括以下组分：超纯水17.5μL，10×buffer 2.5μL，dNTPs 2μL，rTaq 0.15μL，待鉴别DNA 1μL，引物F296 1μL，引物R515 1μL。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述PCR扩增的扩增程序如下：

94℃预变性3min；94℃变性20s，50℃退火20s，72℃延伸20s，38个循环；72℃延伸5min，4℃保存。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述扩增产物的序列通过测序获得。

7.权利要求1所述的鉴别髭鲷未定种sp与横带髭鲷的DNA条形码、权利要求2所述的扩增所述DNA条形码的引物在鉴别髭鲷未定种sp与横带髭鲷中的应用。