[发明专利]一种不同茶类中百草枯的检测方法

说明书

本发明提供一种不同茶类中百草枯的检测方法，采用碱化沉淀、pH值调控、固相萃取和液相色谱串联质谱测定结合，建立了茶叶中百草枯残留量的液相色谱串联质谱仪同位素内标测定方法。本发明可使茶叶中大量茶多酚等杂质沉淀，有效提高固相萃取效率，减少基质对最终结果测定的影响；可校准不同类型茶叶基质差异以及前处理、仪器等因素所带来的回收率偏差，使方法整体适用性和准确性显著提高。在不同茶类中标准品当量浓度5、10和50μg/kg添加水平下，百草枯回收率为94.7％～105.7％，相对标准偏差RSD值为1.2％～8.3％，定量限在0.3～1μg/kg之间。本方法稳定，准确，灵敏，能满足不同茶类种百草枯残留检测需求。

技术领域

本发明属于农药残留量检测技术领域，涉及百草枯农药残留量的测定方法，尤其涉及一种不同茶类百草枯的检测方法。

背景技术

农药(Pesticides)是指用来防治危害农林牧业生产的有害生物和调节植物生长的化学药品。随着人类社会现代化水平的提高和经济规模的扩大，农药已被广泛应用于农林牧业生产等各个领域，但随之产生的农药残留问题也越来越受到各界关注和重视。

百草枯是一种速效触杀型灭生性除草剂，具有一定内吸作用，可使植物绿色组织快速脱水变干枯死。百草枯由于其除草效果好且廉价等特点，被广泛应用于果园、桑园、茶园等农业生产领域。然而百草枯对人畜都具有很高的急性毒性，可经过皮肤、呼吸道和消化道等途径被人体吸收，造成机体的多系统毒性反应和不可逆损伤。另外百草枯慢性毒性研究表明长期累计摄入或接触低剂量百草枯可造成肺纤维化和指甲畸形等病理现象。因此对百草枯使用的安全性越来越受到关注，世界各国都严格限定了农产品中百草枯的最大残留量。

我国GB 2763-2018《食品安全国家标准食品中百草枯等43种农药最大残留限量》中规定了茶叶中百草枯的最大限量为0.2mg/kg，但该标准推荐检测方法SN/T 0293-2014中所适用的植物范围并未涵盖茶叶样品。茶叶中百草枯的测定具有一定挑战，一方面由于百草枯本身其化学结构具有亲水极性等特点，往往以盐的形式残留于环境和作物中；另一方面与其他农产品相比，茶叶是一类具有复杂基质的典型样品，不但含水率低而且还含有大量茶多酚、咖啡碱、色素和糖类等杂质，同时茶叶的品种繁多且加工工艺差异性较大，综上因素都会对检测结果造成影响。因此亟待开发适用于各种茶类中百草枯残留检测方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有百草枯农药茶叶样品的检测方法/一种不同茶类百草枯的检测方法，通过以下步骤实现：

(1)茶叶经植物磨粉碎过筛，得到粒径为0.075～0.150mm茶叶粉末。准确称取1.5～2.5g茶叶试样于50mL离心管，加入50～100μL d₈-百草枯同位素内标，再加入15～25mL甲醇-0.1mol/L盐酸溶液(1:9～3:7，体积比)，涡旋振荡1.5～2.5min后超声波提取10～20min。经4500～5500rpm离心9～11min，取上清液5～10mL至50mL离心管，加入0.4～0.6mol/L强碱溶液0.8～1.1mL和8～12mmol/L磷酸二氢铵缓冲溶液0.8～1.1mL充分振荡，将提取液pH调至4～5之间，8000～10000rpm离心9～11min待净化。强碱溶液指氢氧化钾或氢氧化钠溶液。

(2)将全部上清液转移至活化后WCX 60mg/3cc小柱(小柱活化：先加1～2mL甲醇冲洗，再加1～2mL8～12mmol/L磷酸二氢铵缓冲溶液活化)，控制流速0.8～1.2mL/min，弃去流出液。依次用0.5～2mL8～12mmol/L磷酸二氢铵缓冲溶液和甲醇淋洗，最后用1～2mL甲酸-乙腈溶液(1:9～3:7，体积比)洗脱，收集洗脱液过0.22μm有机系滤膜，供液相色谱-串联质谱分析。

(3)液相色谱串联质谱检测分析