[发明专利]一种米库氯铵对照品的制备方法

说明书

本发明公开了一种米库氯铵对照品的制备方法，涉及大极性季铵盐类化合物的分离纯化技术领域。所述制备方法为将R‑(+)‑5’‑甲氧基劳丹素、3‑氯‑1‑丙醇、碘化钠和碳酸钠在有机溶剂中回流反应后得粗品，粗品进行高速逆流色谱分离，以体积比为1～5：1～10：1～10的溶剂A、溶剂B、溶剂C组成高速逆流溶剂体系，溶剂A为乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯，溶剂B为正丁醇或异丁醇，溶剂C为水，上相为固定相，下相为流动相，分离得到米库氯铵对照品。本发明采用高速逆流色谱法制备得到米库氯铵对照品950U77，与传统的柱层析分离相比，不存在不可逆吸附，避免了样品的损耗，分离时间短，分离效果好，溶剂使用量少，可大批量生产。

技术领域

本发明属于大极性季铵盐类化合物的分离纯化领域，尤其涉及一种米库氯铵对照品的制备方法。

背景技术

米库氯铵，又名美维松，是苄异喹啉类短效非去极化神经肌肉阻滞药，主要用于气管插管和维持肌松。由于米库氯铵结构中含有两个手性碳和两个手性氮，其中手性碳的构型为固定的R型，且分子又是对称结构，故最终合成的米库氯铵由三种未分离的非对映异构体组成，目前市售的成药中三种非对映异构体的比例为顺-顺：顺-反：反-反≈5:40:55。由于成品是未经分离的混合物，不同的工艺操作会使三者比例出现小的偏差，故对其进行含量标定时选择其水解产物950U77(反式水解产物)作为其对照品，来增加含量测定的准确度。

米库氯铵结构式如下：

米库氯铵对照品950U77结构式如下：

专利US4761418使用水溶解950U77粗品后，冷冻到0℃，抽除固体，再用大孔树脂吸附后，用DMF去除剩余的异构体，即得950U77，实际操作发现无法实现两个异构体的分离。现有技术一般采用普通柱层析分离方法分离得到米库氯铵对照品950U77，由于季铵盐类化合物极性大且950U77与反应过程中生成的顺式非对映异构体极性接近，使得分离过程费时费力，且柱层析分离的固定相硅胶对样品有不可逆吸附作用，样品长时间与硅胶接触会产生一部分的降解，使得最终收率不高。高速逆流色谱(HSCCC)是近年发展起来的一种连续的无需固体支撑物的高效、快速的液液分配色谱分离技术，具有样品无损失、无污染、高效、快速等诸多优点，已经广泛应用于生物、医药等领域化学物质的制备分离和纯化。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用高速逆流色谱分离纯化制备米库氯铵对照品的方法，该方法能够快速高效的分离纯化得到米库氯铵对照品。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：一种米库氯铵对照品的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将R-(+)-5’-甲氧基劳丹素、3-氯-1-丙醇、碘化钠和碳酸钠在有机溶剂中回流反应后，过滤，滤液蒸干，得到固体A；

(2)米库氯铵对照品粗品的制备：将步骤(1)所得的固体A用水溶解后，加入阴离子交换树脂，搅拌、抽滤，滤液再用阴离子交换树脂交换一次，向水中加入氯化钠将产品析出，再用萃取剂萃取，蒸干，得到所述米库氯铵对照品粗品；

(3)米库氯铵对照品粗品的纯化：以溶剂A、溶剂B和溶剂C组成高速逆流溶剂体系，将所述高速逆流溶剂体系混合充分后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，下相为流动相，将固定相充满于高速逆流色谱仪的多层线圈分离柱，然后注入流动相；将步骤(2)所得的米库氯铵对照品粗品用下相溶解后进样，收集流出液中第一个峰，向收集液中加入氯化钠将产品析出，再用萃取剂萃取，蒸干后加入乙醚，析出固体，倾去上清液后，固体干燥，得到米库氯铵对照品；

优选地，所述溶剂A为乙酸乙酯或乙酸丙酯或乙酸丁酯，所述溶剂B为正丁醇或异丁醇，所述溶剂C为水。

优选地，所述溶剂A为乙酸乙酯，溶剂B为正丁醇。