[发明专利]神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂及其制备方法

权利要求书

1.神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，由包被膜、吸水纸、涂覆金标抗体的玻璃纤维膜依次粘贴构成；

所述包被膜通过下述方法制备：稀释PGP9.5抗原至浓度为5～20μg/mL，喷涂或涂覆在包被膜上，晾干后封闭、烘干、封袋备用；

所述金标抗体通过下述方法制备：按9～11μg/mL胶体金加入PGP9.5抗体，混匀后静置，离心处理，弃去上清，将沉淀洗涤、溶解备用。

2.根据权利要求1所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，所述PGP9.5抗原为纯化的PGP9.5基因工程重组抗原、或合成多肽、或亲和纯化抗原。

3.根据权利要求1或2所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，所述PGP9.5抗原的纯度≥95％。

4.根据权利要求1所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，所述PGP9.5抗原稀释至浓度为8μg/mL，喷涂或涂覆在包被膜上。

5.根据权利要求1所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，所述金标抗体按10μg/mL胶体金加入PGP9.5抗体中。

6.根据权利要求1或5所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂，其特征在于，所述涂覆金标抗体的玻璃纤维膜通过下述方法得到：将制备好的金标抗体均匀地铺在玻璃纤维膜上，每毫升溶液铺4～8平方厘米，冷冻干燥，封袋，置4℃备用。

7.根据权利要求1-6任一项所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备包被膜：用包被缓冲液稀释包被抗原至浓度为5～20μg/mL，喷涂或涂覆在包被膜上，喷液量为20微升//35厘米，晾干后在37℃封闭液中浸泡60分钟，取出后于37℃烘干2小时，封袋备用；所述包被缓冲液为0.05M pH9.6硫酸盐缓冲液；所述封闭液为含2％BSA、2％脱脂奶的0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液；

S2、制备涂覆金标抗体的玻璃纤维膜：用0.1M碳酸钾调节胶体金pH值至7.5，按9～11μg/mL胶体金加入PGP9.5抗体，混匀后静置，离心处理，弃去上清，将沉淀用标记洗涤液洗涤，将沉淀用10％初始胶体金体积的金标抗体保存液溶解，得到金标抗体；将制备好的金标抗体均匀地铺在玻璃纤维膜上，每毫升溶液铺4～8平方厘米，冷冻干燥，封袋，置4℃备用；所述标记洗涤液为含2％BSA的0.01M pH7.0 PBS溶液；所述金标抗体保存液为含1％BSA、0.5％脱脂奶、5/万NaN3、0.1％Tween-20的0.01M pH7.0PBS溶液；

S3、将包被膜、吸水纸、涂覆金标抗体的玻璃纤维膜裁切后粘贴在塑料底板上，组成大板，再将大板切成单个人份试剂。

8.根据权利要求7所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂的制备方法，其特征在于，所述PGP9.5抗原为纯度95％以上的PGP9.5基因工程重组抗原、或合成多肽、或亲和纯化抗原。

9.根据权利要求7所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂的制备方法，其特征在于，所述胶体金的烧制方法为：用双蒸水将1％氯金酸稀释成0.01％，置电炉煮沸，按每100毫升0.01％氯金酸加入4毫升1％柠檬酸三钠，继续煮沸，直到液体呈亮红色即停止加热，冷却至室温后补足失水。

10.根据权利要求7所述的神经元胞质蛋白基因产物9.5抗体胶体金检测试剂的制备方法，其特征在于，步骤S2离心处理的条件是13000rpm离心30-35分钟。