[发明专利]一种生产柑橘砧木枳壳菌根种苗的方法

权利要求书

1.一种生产柑橘砧木枳壳菌根种苗的方法，其特征在于，包含以下操作步骤：

(1)枳壳种子脱毒处理；

(2)枳壳种子播种：按照10粒枳壳种子接种100～300个孢子的用量，先在播种基质上撒黄雷德克囊霉FS-1-106菌剂，然后覆盖基质，将步骤(1)中脱毒处理后所得枳壳种子在基质中播种，之后盖河沙，播种萌芽后具有8～10片叶，株高10～15厘米的枳壳即为菌根种苗；所述的黄雷德克囊霉FS-1-106菌剂，其制备方法包含如下步骤：

(a)以三叶草为宿主，将黄雷德克囊霉FS-1-106的孢子接种于三叶草幼苗根系，接种量按照每盆三叶草使用1000～1500个孢子；种植于培养基质中，光照培养12～16周，即得黄雷德克囊霉菌丝；采用盆栽(780mm×350mm×250mm)生产模式，三叶草种植密度为50～80株/盆；所述的黄雷德克囊霉FS-1-106，分类命名为黄雷德克囊霉(Redeckera fulvum)FS-1-106，核苷酸序列表如SEQ ID NO:1所示，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期：2020年05月25日，保藏号：CGMCC No.19902；

(b)将步骤(a)中培养12～16周的三叶草停止浇水，待植株干枯后除去茎叶部分，保留根系，培养基质中所得菌丝、培养基质和保留的三叶草根系即黄雷德克囊霉FS-1-106菌剂，菌剂中孢子量为80～120个孢子/g，培养基质中除了有菌丝还含有黄雷德克囊霉的孢子。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的枳壳种子脱毒处理为将枳壳种子在40℃水浴中预处理10分钟，然后再用53℃温水浸泡50分钟。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的基质为新鲜土过筛后的与河沙按照体积比1:1混合所得，先在播种基质上撒黄雷德克囊霉FS-1-106菌剂，然后覆盖2～3厘米厚的基质，将步骤(1)中脱毒处理后所得枳壳种子在基质中播种，之后盖1～2厘米厚的河沙。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中所述的培养基质为河沙和沸石成3:1体积比混合所得，混合后培养基质在121℃高压蒸汽下灭菌1h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(a)中培养期间每2周浇注浓度为50％的Hoagland营养液300～500mL。

6.一种如权利要求1-5任一所述方法生产所得枳壳菌根种苗的应用，其特征在于：将步骤(2)中所得枳壳菌根种苗移栽到含有基质的柑橘育苗杯，栽培管理，用于以枳壳为砧木的柑橘品种的接穗嫁接。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的栽培管理为枳壳菌根种苗移栽后遮荫15～20天，30天后按照正常枳壳种苗管理；随后，每2周喷施50％Hoagland营养液；90天后，每2～3周喷施1/1000的高氮低磷的复合肥(N:P:K＝21：7：12)。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述含有基质的柑橘育苗杯中的基质为按照体积份数比由新鲜土2份、谷壳1份、木糠1份、牛粪0.5份混合所得。