[发明专利]一种维生素B12粗品的制备方法

说明书

本发明涉及一种维生素B12粗品的制备方法，其工艺是将脱氮假单孢杆菌经酸化、水解、絮凝沉淀后过滤，分别收集滤渣和滤液；其中滤渣用丙酮复合溶媒浸提后与滤液混合，再经大孔树脂吸附、丙酮水溶液解析、减压浓缩得到浓缩液；用氰胺水溶液转化、丙酮结晶得到维生素B12粗品。本发明采用由丙酮、异丙醇和水组成的混合液浸提菌渣中腺苷钴胺，可有效提高提取收率，且生产操作连贯性强，产生废水量少；用氰胺替代氰化钠、氰化钾作转化剂，转化过程不易造成VB12水解，转化收率较好，且氰胺毒性较低，减少安全、环保压力，有利于企业安全有序开展日常生产经营。

技术领域

本发明属于生物发酵与提取技术领域，特别是涉及一种维生素B12粗品的制备方法。

背景技术

维生素B12（VB12），英文名称Vitamin B12，又称钴胺素或氰钴素,是一种由含钴的卟啉类化合物组成的B族维生素，包括腺苷钴胺(deoxyadenosylcobalamin)、氰钴胺(cyanocobalamin）、甲钴胺(methylcobalamin)、羟钴胺(hydroxycobalamin)，所含的三价钴位于类似卟啉的咕啉环平面的中心。现有技术中，维生素B12一般特指氰钴胺，其分子的特点含有钴原子及氰基团而形成的一种复合体。

维生素B12是目前已发现的最大、最复杂的维生素分子，也是唯一含有金属离子的维生素；植物不含VB12，也不能制造VB12。肝脏是VB12的最好来源，其次为奶、肉、蛋、鱼等。VB12是核糖核酸和脱氧核糖核酸合成过程中必需的一种辅酶，体内VB12缺乏可以引起周围神经和中枢性脑病等神经系统的病理性改变。

VB12的分子式为 C₆₃H₈₈CoN₁₄O₁₄P，分子量 1355.38,其结构式为：

VB12系深红色结晶或结晶性粉，300℃不溶化；有吸湿性，在空气中能吸收12%水分，其含水结晶在空气中稳定。在210～220℃时颜色变深；能溶于水和醇，不溶于丙酮、氯仿和醚；其溶液呈中性，在pH4.5～5时最稳定，在碱性或强酸性溶液中可缓慢水解。

工业生产中，一般采用脱氮假单孢菌(Pseμdomonas denitrificans)进行有氧发酵生产腺苷钴胺发酵液，再经提取、转化、纯化得到VB12产品。其中，将腺苷钴胺分子中的钴原子上脱去脱氧腺苷钴胺基团，再结合上-CN基团成为氰钴胺的过程，称为转化。一般生产工艺中，通过加入氰化钠或氰化钾，实现转化。这种工艺存在的问题是：

1、腺苷钴胺为胞内发酵产物，腺苷钴胺主要存在于菌丝细胞中，为提高释放率，需要将板框过滤后的滤渣多次加水浸泡，再经离心机高速旋转破壁。由于离心机易污染，需要多次拆洗，影响连贯性作业，且产生废水多，增加了环保处理压力。

2、氰化钠、氰化钾为剧毒药品，安全风险大，管理费用高。需在采购、运输、使用、贮存、包装桶回收等环节，进行特别监管，而且转化过程产生的废气、废水、废固等需进行无害化处理，以确保生态环境的安全。

发明内容

本发明的目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种可实现连续化生产，无毒害作用，安全可靠，减少污水产生，降低环保压力，且能有效提高转化收率的维生素B12粗品的制备方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种维生素B12粗品的制备方法，其特征在于其工艺步骤为：

1）将脱氮假单孢杆菌发酵液经酸化、水解、絮凝沉淀后过滤，分别收集滤渣和滤液；