[发明专利]一种提升角蛋白酶异源表达的启动子

权利要求书

1.一种启动子，其特征在于，所述启动子为角蛋白酶基因的启动子，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示。

2.根据权利要求1所述的启动子，其特征在于，所述角蛋白酶基因的核苷酸序列为如SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.18或SEQ ID NO.19所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.17～19具有95％以上同源性的核苷酸序列。

3.一种含有权利要求1或2所述的启动子的表达载体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述载体为适于芽孢杆菌表达的载体。

5.一种表达角蛋白酶的重组菌，其特征在于，含有权利要求1所述的启动子。

6.根据权利要求5所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的宿主为枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、脆弱杆菌、克劳氏芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌或苏云金芽孢杆菌。

7.一种权利要求5或6所述的重组菌的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)以枯草芽孢杆菌基因组为模板，扩增启动子序列，并进行突变，得到核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示的启动子序列；

(2)将步骤(1)的启动子片段回收后构建到携带角蛋白酶基因的质粒中得到重组质粒；

(3)将步骤(2)的重组质粒转化到宿主菌中，得到重组菌。

8.一种权利要求5或6所述的重组菌生产角蛋白酶的方法，其特征在于，将所述重组菌以1～10％接种量接种到发酵罐中，以发酵温度28～40℃、转速100～1000rpm、通气量为0.5～3vvm、pH为5.5～8.5的条件下发酵生产，得到角蛋白酶。

9.一种权利要求1或2所述的启动子在促进角蛋白酶表达中的应用。