[发明专利]人源降钙素原的单克隆抗体其制备方法和用途在审
| 申请号: | 202010638637.9 | 申请日: | 2015-07-16 |
| 公开(公告)号: | CN111793133A | 公开(公告)日: | 2020-10-20 |
| 发明(设计)人: | 叶森;唐勇;何仕钊;汪金凤 | 申请(专利权)人: | 南京诺尔曼生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C07K16/26 | 分类号: | C07K16/26;G01N33/74;G01N33/577;C12N5/20;C07K14/585;C12N15/70;C12N15/16;C12R1/91 |
| 代理公司: | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人: | 孟潭 |
| 地址: | 210000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 降钙素 单克隆抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种制备抗降钙素原抗体的方法,包括以下步骤:
(1)对降钙素原N端氨基酸残基进行突变,获得与突变后氨基酸残基序列相对应的核苷酸序列;
(2)将所述核苷酸序列插入到原核表达载体中,进行诱导表达以及蛋白纯化;
(3)将纯化蛋白作为抗原免疫动物,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞,经筛选获得可稳定分泌抗降钙素原抗体的杂交瘤细胞,并获得相应单克隆抗体;
其中突变后的降钙素原氨基酸序列为SEQ ID NOs:2-4,且所述抗降钙素原抗体获得自保藏号为CGMCC No.10417的杂交瘤细胞系。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述的抗降钙素原抗体为单克隆抗体。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述抗降钙素原抗体特异性结合具有氨基酸序列为RLLLAALVQDYV(SEQ ID NO:1)的表位。
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