[发明专利]一种首荟通便胶囊质量检测方法

权利要求书

1.一种首荟通便胶囊质量检测方法，其特征在于，以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌，采用一标多测的分析方法，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，以HPLC测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量；

所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌是以氯仿-甲醇混合溶液为第一次展开剂，以二氯甲烷-甲醇-乙酸-水混合溶液为第二次展开剂；按体积比计，氯仿：甲醇=7：3；按体积比计，二氯甲烷：甲醇：乙酸：水=15：2：0.5：0.1，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌包括以下步骤：

A、供试溶液的制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇回流提取，得提取液，取上清液，用乙醚萃取，收集乙醚层，合并，蒸干，残渣加甲醇溶解，滤过，作为供试品溶液；

B、对照品溶液制备：取何首乌对照药材，按步骤A所述方法制成对照药材溶液；另分别取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚、大黄素对照品，精密称定，加入甲醇溶解，制成对照品溶液；

C、点样、展开：吸取上述5种溶液各2-5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以氯仿：甲醇=7：3为展开剂，展至3cm，取出，晾干，再以二氯甲烷：甲醇：乙酸：水=15：2：0.5：0.1为展开剂，展至8cm，取出，晾干，置紫外光灯以365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

所述一标多测法测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量包括下列步骤：

A、供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，过筛，作为供试样品，备用；取样品粉末适量，按重量/体积计加入料液比为1：50-120倍量甲醇溶液，进行超声提取，提取时间为30-75min，放冷至室温，称重，用溶剂补足减失重量，摇匀，静置，吸取上清液，滤过，弃去初滤液，以续滤液作为供试品溶液；

B、对照品溶液制备：制备2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的单一对照品溶液和7种成分的混合对照品溶液；

C、相对保留时间的确定：吸取步骤B所述的7种单一对照品溶液和7种成分混合对照品溶液，分别注入HPLC中进行检测，记录7种单一对照品溶液保留时间，同时记录7种成分混合对照品溶液中各成分的保留时间，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，通过公式RRT=T_k/T_s计算柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚相对于内参物2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的相对保留时间；公式中T_s为内参物保留时间，T_k为混合对照品溶液中其它6种待测成分的保留时间；

D、相对校正因子的确定：吸取步骤B所述的混合对照品溶液，注入HPLC，测定，记录混合对照品溶液7种成分的峰面积，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，根据相对校正因子计算公式f_k/s=（A_s×C_k）/(A_k×C_s)计算柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的相对校正因子f_k/s；公式中A_s为内参物峰面积，C_s为内参物质量浓度，A_k为其他组分峰面积，C_k为其他组分质量浓度；

E、多成分含量测定：分别吸取步骤A所述的供试品溶液和步骤B所述2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液，注入HPLC，测定，所述HPLC色谱条件为：采用C18色谱柱；以乙腈为流动相A，0.07%-0.12%磷酸溶液为流动相B进行线性梯度洗脱，洗脱程序为：

流速：0.8mL/min-1.2mL/min；柱温：26-34℃；进样量：4-10μL；检测波长：212-230nm；

根据公式C_样=（A_样×C_对）/A_对计算供试品溶液中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量；根据步骤C相对保留时间RRT对供试品溶液中的柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚6种成分进行定性，根据步骤D所述相对校正因子f_k/s计算供试品溶液中柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量；式中A_样为供试品的峰面积，C_对为对照品的浓度，A_对为对照品的峰面积。