[发明专利]一种有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法

权利要求书

1.一种有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述方法为：将蔗糖加入有机溶剂中，再加入固定化脂肪酶和乙酸乙烯酯，混合均匀，在30-40 ℃水浴、摇床转速120-180 r/min下反应12-20 h，过滤，滤饼回收固定化脂肪酶，滤液真空蒸馏回收溶剂，得到蔗糖-6-乙酯产品；所述有机溶剂是由N,N-二甲基甲酰胺与叔戊醇或叔丁醇以体积浓度55~30%:45~70%混合而成，总量100%；所述固定化脂肪酶是将脂肪酶采用大孔树脂吸附固定而成；所述脂肪酶为黑曲霉脂肪酶或假丝酵母脂肪酶。

2.如权利要求1所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述有机溶剂是由N,N-二甲基甲酰胺与叔戊醇以体积浓度55~30%:45~70%混合而成，总量100%。

3.如权利要求1所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述有机溶剂体积加入量以蔗糖重量计为125-330ml/g；所述蔗糖与固定化脂肪酶质量比为1：0.2-1.0；所述蔗糖与乙酸乙烯酯质量比为1：1-5。

4.如权利要求1所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述脂肪酶酶活为10-30万单位/克。

5.如权利要求1所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述大孔树脂型号包括D4006型、D3520型、D1300型。

6.如权利要求1所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述固定化脂肪酶按如下方法制备：将脂肪酶溶解在去离子水中，加入十二水合磷酸氢二钠与磷酸二氢钠，搅拌均匀，形成0.05mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液的酶液，加入大孔树脂，在20-35℃保温，80-100转/分钟搅拌下，吸附1-3h，过滤，滤饼真空干燥至含水量3~5%，得到固定化脂肪酶。

7.如权利要求6所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述去离子水体积用量以脂肪酶重量计为 150-500ml/g；所述脂肪酶与十二水合磷酸氢二钠和磷酸二氢钠质量比分别为1:0.5-1.5和1:0.5-1.0；所述脂肪酶与大孔树脂重量比为1：2-4。

8.如权利要求6所述有机溶剂中酶法合成蔗糖-6-乙酯的方法，其特征在于所述大孔树脂在加入酶液前先进行预处理，所述预处理方法为：将大孔树脂加入10倍质量的体积浓度95%乙醇水溶液，于室温、150r/min的条件下震荡洗涤24小时，并于中途两次更换95%乙醇水溶液，震荡洗涤结束后，每次用两倍质量蒸馏水洗涤五次，抽滤，滤饼即为完成预处理的大孔树脂。