[发明专利]一种保健酒抗疲劳成分筛选方法

说明书

本发明公开了一种保健酒抗疲劳成分筛选方法，该方法包括：对保健酒成分进行定性分析；对保健酒特征成分进行定量分析；利用斑马鱼模型对抗疲劳药效进行评价；利用最小二乘法对抗疲劳主效成分群进行筛选。本发明具有以下优点：(1)采用HPLC‑QTOF‑MS/MS、GC‑MS技术对保健酒成分进行全面定性分析；(2)采用HPLC‑QQQ‑MS定量分析方法、GC‑MS定量分析方法对保健酒可监控成分进行了定量分析；(3)通过斑马鱼模型评价保健酒的抗疲劳功效，并通过最小二乘法对抗疲劳主效成分群进行筛选，实现对保健酒抗疲劳成分的质量控制。

技术领域

本发明涉及配制酒质量控制领域，具体而言，涉及一种保健酒抗疲劳成分筛选方法。

背景技术

质量控制方法是保证产品质量并使产品质量不断提高的一种质量管理方法。它通过研究、分析产品质量数据的分布，揭示质量差异的规律，找出影响质量差异的原因，采取技术组织措施，消除或控制产生次品或不合格品的因素，使产品在生产的全过程中每一个环节都能正常的、理想的进行，最终使产品能够达到人们需要所具备的自然属性和特性，即产品的适用性、可靠性及经济性。

保健酒是用具有滋补和治疗功能的中药材与酒配制而成，是属于配制酒的一种，有防治疾病和强壮身体的作用。在保健酒的质量控制中，通常是通过采取不同的检测手段以保证酒的各种成分指标的稳定。专利CN1991361公开了一种用指纹图谱技术检测中国保健酒质量的方法，通过建立中国保健酒指纹谱图数据库，在样品检测时通过对比分析确定保健酒质量。

发明内容

本发明涉及一种保健酒抗疲劳成分筛选方法，通过对保健酒成分定性定量分析、斑马鱼模型抗疲劳药效评价、抗疲劳主效成分群筛选建立保健酒抗疲劳成分质量控制方法。

本发明的方案如下：

(1)保健酒成分定性分析

采用HPLC-QTOF-MS/MS技术，对保健酒所含化学成分进行了系统鉴定研究。

色谱条件：柱温25℃；流动相：水(含一定浓度甲酸)(A)-乙腈(含一定浓度甲酸)(B)；流速：0.8mL/min；进样体积：2μL。梯度洗脱条件为：0-2.5min，10％B；2.5-20min，10-20％B；20-35min，20-35％B；35-40min，35-60％B；40-45min，60-90％B；45-50min，90-95％B；50-60min，95％B。

质谱条件：干燥氮气流速：10L/min；干燥氮气温度：350℃；雾化压力：35psig；鞘气温度：350℃；鞘气流速：11.0L/min；毛细管电压：4000V；锥孔电压：65V；OCT 1 RF Vpp：750V；裂解电压：135V；二级碰撞能量：15V、25V、35V、50V。正、负离子模式下全扫描模式监测，离子质量数扫描范围设置为m/z 50-1700。

采用GC-MS技术，对保健酒中来自当归、砂仁、仙茅、益智、肉桂、丁香的挥发性成分进行了系统鉴定。

色谱条件：仪器：Agilent 7890B GC-5977A MSD；色谱柱：Agilent19091S-433UI:HP-5ms Ultra Inert(30m×250μm,0.25μm)；0℃-325℃；载气：99.999％高纯He；流速：1mL/min；进样体积：1μL。分流比：10︰1；升温程序如下：初始温度40℃，维持5min，以8℃/min升温至250℃。

质谱检测条件：全扫描模式监测，离子质量数扫描范围设置为m/z 50–500，扫描速度1562[N＝2]，扫描频率2.9/s。

(2)保健酒成分定量分析

建立HPLC-QQQ-MS定量分析方法，测定保健酒中来自于淫羊藿、葛根、肉苁蓉、黄芪、丹参、枸杞子、怀牛膝、当归等药材中22个特征性成分的含量。