[发明专利]抗新型冠状病毒的抗体、制备方法和应用

说明书

本发明公开了抗新型冠状病毒的抗体、制备方法和应用。本发明还涉及编码抗体的核酸分子。本发明还涉及使用这些抗体进行诊断和治疗的方法。

技术领域

本发明属于细胞免疫学、分子生物学领域，涉及抗新型冠状病毒的抗体、制备方法和应用。

背景技术

国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为SARS-CoV-2，世界卫生组织将感染此病毒引起的肺炎称为COVID-19。此病毒传染性强，传播途径广。该病毒能迅速适应人体环境，感染后在潜伏期即具有传播能力，同时还有一些无症状感染者报道，甚至在多种动物体内也检测到病毒核酸。这些因素使得对该病毒的防控变的非常复杂，而且目前没有有效治疗药物及疫苗上市。

SARS-CoV-2属于冠状病毒属，为单股正链RNA病毒，大小约30kb，与 SARS-CoV相似性为79％，与蝙蝠体内分离的冠状病毒(Coronavirus，CoV) 相似性最高约88％。SARS-CoV-2具有典型的冠状病毒特征，病毒包膜上有典型的棘突，形似日冕。Spike蛋白(刺突蛋白)是冠状病毒最重要的表面膜蛋白，决定了病毒的宿主范围和特异性，是宿主中和抗体的重要位点以及疫苗设计的关键靶点。

由于特异性治疗药物及有效疫苗尚未研发成功，目前已有恢复期病人血浆用于治疗重症患者的尝试，且具有明显的效果。由于血浆及血浆制品成分复杂，且可能具有潜在的危险因素。病毒的中和性抗体，特别是全人源单克隆的在病毒诊断及治疗方面显得尤为重要。单克隆抗体能够识别病毒的单一抗原表位，有些具有中和作用的单克隆抗体能够通过结合在病毒特异性位点，例如受体结合部位，蛋白酶切位点，膜融合部位的附件，从而感染病毒生命周期中的粘附宿主细胞，利用膜融合及表面蛋白水解等机制而起到中和作用。其中从恢复期病人体内获得的全人源单克隆抗体更具有成药潜能。首先因为恢复期患者体内的免疫系统经过充分的免疫应答，B细胞经过充分的体细胞高频突变，使抗体亲和力得到最大程度的成熟。其次因为人体免疫系统全人源抗体不产生免疫应答，人源抗体成药更具安全性。因此，高亲和力和高中和活性的人源抗体对新型冠状病毒疫情控制和重症患者治疗方面都具有重大的应用价值。

发明内容

本发明提供了抗体或其抗原结合片段，它们能特异地结合新型冠状病毒S蛋白。这些抗体是人源单克隆杭体。

根据本发明的一个方面，本发明提供了能与新型冠状病毒S蛋白特异性结合的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQ ID NO.1-3所示的序列的CDR区的重链可变区。

在本发明的具体实施方案中，重链可变区包含SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

本发明的抗体或其抗原结合片段进一步包含含有SEQ ID NO.5-7所示的序列的CDR区的轻链可变区。

在本发明的具体实施方案中，轻链可变区包含SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。

本发明的抗体或其抗原结合片段可以是免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgE、IgA 或IgD分子，在一种优选的实施方案中，这种人源抗体是IgG。可能是IgG1、IgG2、 IgG3、或IgG4亚型。这种抗体或其抗原结合片段可以从Fab片段、F(ab’)2片段、 Fv片段、单链抗体或嵌合抗体衍生而来。

在一些实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段可以作为融合蛋白的一部分。

根据本发明的另一个方面，本发明提供了包含前面所述的抗体或其抗原结合片段编码序列的多核苷酸分子，特别是提供了编码重链和轻链可变区、编码重链和轻链CDR1到CDR3连续的氨基酸序列以及编码单独CDRs的核苷酸序列。

所述核酸分子包括SEQ ID NO.9和10所示的序列。

根据本发明的又一个方面，本发明提供了一种表达载体，其包含前面所述的多核苷酸分子。