[发明专利]青皮总黄酮和总生物碱的联合提取方法及其应用

说明书

本发明公开了一种青皮总黄酮和总生物碱的联合提取方法及其应用；包括以下步骤：S1植物原料用酸水超声或加热提取，分别收集提取液和药渣；S2对步骤S1的提取液进行超滤纯化；S3将步骤S2的滤液浓缩至小体积，过滤，收集滤液，得青皮总生物碱；S4将步骤S1的药渣用醇溶剂超声或加热提取，收集提取液；S5对步骤S4的提取液进行超滤纯化；S6将步骤S5的滤液浓缩至小体积，并调节pH至2‑4之间，过滤，收集固体，得青皮总黄酮。青皮总生物碱和总黄酮按照一定比例复配而成的青皮提取物，对介导皮肤疼痛、瘙痒的重要受体——瞬时感受器电位香草酸受体1有显著的拮抗作用，因而具有良好的镇痛功效，可用于抗过敏产品的制备。

技术领域

本发明属于中草药提取技术领域，涉及一种青皮总黄酮和总生物碱的联合提取方法及其应用；具体涉及一种青皮总生物碱和总黄酮的联合提取工艺及其在制备具有抗过敏功效的产品中的应用。

背景技术

全球有52％的消费者认为自己的皮肤为敏感性肌肤。敏感性肌肤是临床上常见的问题性皮肤：轻微的外界刺激即可使皮肤自我保护反应激活，引起皮肤刺痛、灼烧、瘙痒、泛红等症状。而灼烧感和刺痛感是瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptorpotential vanilloid 1,TRPV1,也称为辣椒素受体)过度表达的结果，TRPV1是一种可以高效介导Ca²⁺内流的阳离子通道，广泛分布于神经元、免疫细胞、多种脏器上皮细胞及角质形成细胞等细胞中，该受体可探测和整合诱发痛觉的化学和热刺激信号，它可以将化学、机械和热刺激信号转化为动作电位，并将这些信息上传到中枢最后使机体产生痛觉或不舒服的感受，近年来TRPV1通道蛋白已经成为开发新的镇痛药物的重要靶点，通过抑制Ca²⁺内流能够有效缓解疼痛。

近年来中药镇痛抗炎活性成分一直是药物研发的热点之一，学者对镇痛中药进行大量研究，发现了许多有效的中药镇痛成分，主要包括生物碱类、黄酮类、皂苷类、挥发油类等。青皮为柑橘(Citrus reticulata Blanco)的干燥幼果或未成熟果实的果皮，含有丰富的生物碱(辛弗林、N-甲基酪胺)和黄酮类(柚皮苷、橙皮苷和多甲氧基黄酮类)成分，有文献报道称青皮提取物为有效的Ca²⁺拮抗剂(TRPV1抑制相关)，由此可推断青皮提取物对敏感性肌肤具有一定的缓解作用。我国柑橘种植面积广阔，青皮资源丰富，因而成为具有工业化生产价值的原料，目前对青皮有效成分的研究常常是单一类成分的提取、分离，如青皮总黄酮的提取。中药中各类成分对整体药效往往都起着一定的作用，我们常常单独分离研究一种成分而忽视了彼此之间的协同效应。因此，在本发明中我们将总生物碱和总黄酮按照一定的配比作用于TRPV1细胞镇痛模型上，得到了比单一青皮总黄酮、单一总生物碱镇痛效果更好的组合物。

青皮药材除了黄酮和生物碱类成分，还含有蛋白质、果胶和多糖等物质，这些物质也会被提取出来存在于粗提液中。为了得到较纯的总黄酮和总生物碱类物质，需要将上述杂质除去。现有的提取青皮、枳实、枳壳黄酮和生物碱的方法多是采用乙醇提取或是水煎煮，再经树脂吸附、萃取或离子交换纯化，如专利文件CN01106994公开的方法，先采用石油醚脱脂，稀碱溶液回流提取，再用树脂吸附，分步洗脱得到黄酮和生物碱。现有的方法都用到树脂柱层析，在工业生产中树脂柱层析、树脂再生处理需耗费大量的有机溶剂和酸、碱，既不环保又耗费工时。

发明内容

本发明的目的在于针对现有工艺的不足，先通过酸水提取生物碱、超滤除去大分子杂质、再浓缩过滤得到纯度较高的生物碱；药渣再用高浓度的醇提取，经过超滤、浓缩、调酸得到黄酮，不仅对药材进行了充分的利用，同时避免了在生产中使用树脂，使工艺简单省时，更加环保。本发明将总生物碱和总黄酮按照一定的比例复配并应用到TRPV1镇痛模型中，得到最佳的镇痛组合，应用于抗过敏产品的开发中。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

第一方面，本发明涉及一种青皮提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

S1、青皮药材用酸水超声或加热提取，分别收集提取液和药渣；