[发明专利]一种口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂及其制备方法在审

专利信息
申请号: 202010408158.8 申请日: 2020-05-14
公开(公告)号: CN111529701A 公开(公告)日: 2020-08-14
发明(设计)人: 杨德志;毕力格;特格喜白音;特木其乐;陈沙娜;斯钦 申请(专利权)人: 内蒙古自治区国际蒙医医院(内蒙古自治区蒙医药研究所)
主分类号: A61K39/215 分类号: A61K39/215;A61K9/48;A61K47/10;A61P31/14;C12N15/74;C12N15/50;C12N1/21;C12R1/42
代理公司: 苏州和氏璧知识产权代理事务所(普通合伙) 32390 代理人: 李晓星
地址: 010065 内蒙*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要:
搜索关键词: 一种 口服 产生 新型 冠状病毒 抗体 制剂 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂,其特征在于,包括减毒菌体,减毒菌体内含有表达特异性分子COVID-19-S的DNA序列,DNA序列如SEQ NO.3所示。

2.如权利要求1所述的口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂,其特征在于,所述减毒菌体为减毒沙门氏菌,所述DNA序列负载在pCMV载体上。

3.如权利要求1所述的口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂,其特征在于,所述减毒菌体处于0号肠溶胶囊内,0号肠溶胶囊内填充有200μl 30%甘油的PBS悬液。

4.如权利要求2所述的口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂,其特征在于,0号肠溶胶囊内的减毒菌体数为(0.1-10)×107个。

5.一种口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂的制作方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤一、SEQ NO.1和SEQ NO.2所示的DNA序列作为引物,以pKD3为模板进行PCR获得片段,片段的序列如SEQ NO.4所示;

步骤二、将带有pKD46质粒的野生型鼠伤寒沙门氏菌扩繁培养并制作L感受态细胞;

步骤三、将步骤一中的获得的片段导入L感受态细菌形成转化体;然后将转化体在含有浓度为50μg/mL的氯霉素的LB琼脂培养板上生长过夜,然后PCR检测得到阳性克隆的转化体,阳性克隆的转化体在42℃划单菌落培养去掉野生型鼠伤寒沙门氏菌内的pKD46质粒,然后向去掉pKD46质粒的野生型鼠伤寒沙门氏菌内的导入pCP20质粒获得无抗性ΔSTM1231基因突变菌株SD1231,即获得减毒菌体;

步骤四、将表达特异性分子COVID-19-S的DNA序列负载在pCMV质粒上,得到pCMV-COVID-19-S转化到菌株SD1231内获得阳性菌株即制得口服后产生新型冠状病毒抗体的菌株。

6.如权利要求5所述的口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂的制作方法,其特征在于,所述步骤四中,将pCMV-COVID-19-S转化到菌株SD1231内,然后在加有浓度为12.5μg/mL的氨苄青霉素的LB液体培养基培养并筛选出pCMV-COVID-19-S转化到菌株SD1231内的阳性菌株。

7.如权利要求5所述的口服后产生新型冠状病毒抗体的制剂的制作方法,其特征在于,所述pCMV-COVID-19-S购自南京金斯瑞生物科技有限公司。

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