[发明专利]一种猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白的抗体联检试剂盒及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白的抗体联检试剂盒，其中，所述抗体联检试剂盒包括一个或多个猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片、酶标试剂，所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片包被有猪伪狂犬病病毒gD蛋白、猪伪狂犬病病毒gE蛋白、质控品、空白对照点，所述质控品为羊抗鼠多克隆抗体，所述空白对照点为检测背景值，所述酶标试剂为含有酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体、酶标记猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的溶液；所述羊抗鼠多克隆抗体的包被量为1～4ng/点；所述质控品点共三个点，质控品点1的包被量为大于等于1ng/点而小于2ng/点；质控品点2的包被量为2ng/点；质控品点3的包被量为大于2ng/点而小于等于4ng/点。

2.根据权利要求1所述的抗体联检试剂盒，其中，所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片包被的猪伪狂犬病病毒gD蛋白为猪伪狂犬病病毒HN1201株的gD蛋白，所述包被的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为猪伪狂犬病病毒HN1201株的gE蛋白；

所述酶标试剂中所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体为酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体5G7或/和3B6，所述酶标记猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体为酶标记猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体11H1，当所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体为酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体5G7和3B6时，所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体5G7和所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体3B6含量比例为1∶1；

所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片中所述猪伪狂犬病病毒gD蛋白的包被量为0.05～10ng/点，优选地，所述猪伪狂犬病病毒gD蛋白的包被量为0.25～8ng/点，更优选地，所述猪伪狂犬病病毒gD蛋白的包被量为4ng/点；

所述猪伪狂犬病病毒gE蛋白的包被量为0.02～8ng/点，优选地，所述猪伪狂犬病病毒gE蛋白的包被量为0.1～4ng/点，更优选地，所述猪伪狂犬病病毒gE蛋白的包被量为1ng/点；

所述羊抗鼠多克隆抗体的包被量为1ng/点、2ng/点和4ng/点；

进一步优选地，所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片中所述猪伪狂犬病病毒gD蛋白的包被量为4ng/点、或2ng/点，所述猪伪狂犬病病毒gE蛋白的包被量为2ng/点、或1ng/点；

所述酶标试剂中所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体5G7、3B6的IFA效价均为1∶3200～1∶6400，所述酶标记猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体11H1的IFA效价为1∶3200～1∶6400，所述酶标试剂为含终体积20％V/V胎牛血清的PBS溶液，其中还含有终体积0.05％V/V的所述酶标记猪伪狂犬病病毒gD蛋白单克隆抗体5G7和/或3B6，以及终体积0.05％V/V的所述酶标记猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体11H1。

3.根据权利要求1所述的抗体联检试剂盒，其中，所述抗体联检试剂盒还包括样品稀释液、底物液、洗涤液；所述样品稀释液为含10％V/V胎牛血清、0.1％V/V吐温20、1％W/V BSA、0.05％～0.5％W/V Casein、1％W/V Proclin300的PBS溶液，所述底物液为TMB溶液，所述洗涤液为含1％V/V吐温20的PBS溶液；优选地，所述样品稀释液为含10％V/V胎牛血清、0.1％V/V吐温20、1％W/V BSA、0.1％W/V Casein、1％W/V Proclin300的PBS溶液，所述底物液为1-step Ultra TMB。

4.根据权利要求2所述的抗体联检试剂盒，其中，所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片还包被有CSFV E2蛋白；

所述CSFV E2蛋白的包被量为0.05～12.8ng/点；优选地，所述CSFV E2蛋白的包被量为0.2～6.4ng/点；优选地，所述CSFV E2蛋白的包被量为6.4ng/点；

进一步优选地，所述猪伪狂犬病病毒gD、gE蛋白抗体检测芯片包被有4.0ng/点猪伪狂犬病病毒gD蛋白、1.0ng/点猪伪狂犬病病毒gE蛋白和6.4ng/点CSFV E2蛋白；

所述酶标试剂中还包含终体积0.05％V/V的酶标CSFV E2单克隆抗体15A9，所述酶标抗体15A9的IFA效价为1∶6400～1∶25600。