[发明专利]一种Cabs1蛋白抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.Cabs1蛋白抗体，其特征在于：采用以下步骤制备得到：

步骤1，Cabs1编码序列的优化：利用密码子的简并性和偏好性原则，在保证翻译后的蛋白序列不变的前提下对Cabs1的编码序列进行优化，以利于蛋白的成功表达，优化后的Cabs1编码序列如SEQ ID NO.1所示；

步骤2，原核表达载体的构建：用NdeI和HidII内切酶对原核表达载体PET-30a(+)进行双酶切备用，在优化后的Cabs1编码序列上加入酶切位点和多聚组氨酸标签，然后与载体连接，转化BL21(DE3)大肠杆菌，选取阳性菌株用于诱导Cabs1蛋白的表达；

步骤3，Cabs1蛋白的诱导表达与纯化：用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导Cabs1蛋白的表达，然后在37℃条件下扩大培养，培养12 h后收集细菌，提取蛋白，利用镍柱纯化目标蛋白，所述Cabs1蛋白的序列如SEQ ID NO.2所示；

步骤4，Cabs1抗体的制备：将Cabs1抗原蛋白与免疫佐剂一起免疫新西兰大白兔，经过三次加强免疫后，采集血清，对抗血清进行抗原抗体亲和纯化，得到Cabs1蛋白抗体。

2.根据权利要求1所述的Cabs1蛋白抗体，其特征在于：步骤1中基因序列的优化和步骤3中诱导是用0.5 M 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷在37℃诱导4 h。

3.权利要求1所述的Cabs1蛋白抗体在检测Cabs1蛋白中的应用。

4.权利要求1所述的Cabs1蛋白抗体在检测小鼠精子异常中的应用。

5.权利要求1所述的Cabs1蛋白抗体在检测精子异常中的应用。