[发明专利]一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法

说明书

本发明公开了一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法，具体制备步骤包括在发酵液(羟基酪醇含量1g/L以上)中加入多巴胺，和聚烯丙胺，并通入二氧化碳，调节pH至酸性，得酸性发酵液；将酸性发酵液过滤，去除菌体，通过超滤浓缩，进一步去除蛋白等杂质；再经过滤，去除色素等有机小分子；用醋酸调节pH为2‑4,并通入氮气，后进行薄膜蒸发浓缩，温度控制在35‑40℃，得浓缩液；将浓缩液进行冷冻干燥成固体；固体在室温下溶于酯类溶剂，过滤取清液；清液在40℃下干燥为固体，即得产品羟基酪醇。本发明可有效纯化发酵液中的羟基酪醇，且有效保障提取过程中产品不被空气氧化。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体是一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法。

背景技术

羟基酪醇是橄榄中具强抗氧化性的一种多酚类化合物，也是动物脑内多巴胺的代谢产物之一。羟基酪醇，又名3，4-二羟基苯乙醇，分子式为C₈H₁₀O₃，分子量为154.16，为无色或浅黄色油状物。大量研究表明，羟基酪醇具有良好的生物活性，主要包括广谱的抗微生物活性，预防多种自由基的直接损伤，预防糖尿病及提高脂肪组织对胰岛素的敏感性，减小动脉粥样硬化的病灶范围和防止心肌缺血/再灌注损伤，改善β-淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默症以及抑制肿瘤增殖等。由于其抗氧化活性，使其被认为是清除自由基最佳的天然抗氧化剂之一，其自由基清除能力是槲皮素的两倍、表儿茶酸的三倍。国外很多机构已经把羟基酪醇作为添加剂加入到保健品和食品中，发现有很好的抗衰老和预防疾病作用。

羟基酪醇合成的报道很多，是研究的热点。有文献报道用3，4-二甲氧基苯乙醇为原料合成羟基酪醇，此方法最后一步脱保护反应收率只有10％，而且合成步骤较长，成本过高.KHAFAGY等报道用三氯化锡催化剂直接对3，4-二甲氧基苯乙醇脱保护，合成的羟基酪醇收率也不理想，且反应不易控制，易发生傅克烷基化副反应。BOVICELLI等报道了一条以酪醇为原料合成羟基酪醇的路线，该路线需在苯环上引入一个羟基，这涉及到羟基的保护与脱保护等过程，步骤繁琐，过程中也用到氢化铝锂和三溴化硼等不容易操作的试剂，该方法无论实验室合成还是工业生产都很少采用.帝斯曼公司申请了用邻苯二酚为原料制备羟基酪醇的专利。但此路线需要耗费大量溶剂，产生大量废水，且反应时间较长，较少有人采用。许超等报道了另一种以邻苯二酚为原料合成羟基酪醇的方法，该路线不仅反应步骤长，同时用到极其危险的三溴化硼，反应比较剧烈，实验室较少采用。延永等以3，4-二甲氧基苯乙酸为起始原料，此反应使用了腐蚀性很强的溴化氢和高度易燃易爆的金属钠，具有一定的危险性。因此，使用新方法安全高效地合成羟基酪醇具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法，以解决现有技术中的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法，具体制备步骤包括：

(1)在发酵液(羟基酪醇含量1g/L以上)中加入多巴胺，和聚烯丙胺，并通入二氧化碳，调节pH至酸性，得酸性发酵液；

(2)将酸性发酵液过滤，去除菌体，通过超滤浓缩，进一步去除蛋白等杂质；

(3)再经过滤，去除色素等有机小分子；

(4)用醋酸调节pH为2-4,并通入氮气，后进行薄膜蒸发浓缩，温度控制在35-40℃，得浓缩液；

(5)将浓缩液进行冷冻干燥成固体；

(6)固体在室温下溶于酯类溶剂，过滤取清液；清液在40℃下干燥为固体，即得产品羟基酪醇。

优选的，步骤(1)中多巴胺的加入量是羟基酪醇含量的40-60％。

优选的，步骤(1)中多巴胺的加入量是羟基酪醇含量的40-45％。