[发明专利]一种新冠状病毒抗体检测试剂盒、检测方法和用途

说明书

本发明为解决或改善现有技术中存在的RNA保存时间短易降解、容易出现假阴性、特异性差和可靠性差等技术问题，本发明公开了一种新冠状病毒抗体检测试剂盒、检测方法和用途，所述试剂盒包括R1试剂、R2试剂、磁微粒试剂和化学发光底物；所述检测方法包括步骤：以N蛋白和S蛋白的融合蛋白作为检测的复合物，使用磁微粒化学发光法，通过SA级联放大对新冠状病毒抗体检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、通量大、速度快、自动化程度高等明显的优点；本发明检测样本为血清或血浆，样本易采集，安全性较高，样本中的抗体不易降解，保存期限更长。

技术领域

本发明属于抗体检测技术领域，具体涉及一种新冠状病毒抗体检测试剂盒、检测方法和用途。

背景技术

2019-nCoV病毒也是一种由外膜糖蛋白包裹起来的正义RNA病毒，但它在病毒进化树中属于新的分支，是一种全新的冠状病毒。研究表明该病毒具有明显的人传人特性，相对2003年爆发的SARS病毒，具有更高的传染性，其感染平均潜伏期是4.8天，其症状爆发到可分离到病毒的平均时间是2.9天，比SARS的4.2天低，需要采用比SARS更严厉的防疫措施。据研究报道，2019-nCoV病毒的基因组虽然和SARS相似度只有79％，但在蛋白质水平上，它们具有很高的相似度。通过三维结构模拟，发现2019-nCoV病毒的棘突蛋白(S蛋白)具有和SARS病毒相类似的受体结合部位，可能也是通过和人细胞上的ACE2蛋白结合进而感染人。

感染新冠病毒的患者，早期轻微症状包括干咳、发热、乏力、头昏和胸闷等，病情严重的，后期会迅速发展为急性呼吸衰竭，进而引发患者的其它并发症，导致死亡。目前新冠病毒患者的确诊主要包括发热等临床症状排查、肺部炎症的CT检验、血清生化指标的监控和核酸RNA的检测以及临床医生的诊断。因此必须要有更特异性，更可靠的检测手段。目前的核酸检测手段，样本需采集咽拭子或肺泡灌洗液，存在气溶胶污染等安全性问题，对于医护人员是很大的挑战，同时核酸检测还存在RNA易降解，容易出现假阴性结果。

发明内容

为了解决或改善现有技术中存在的RNA保存时间短易降解、容易出现假阴性、特异性差和可靠性差等技术问题的至少一项，本发明的目的在于提供一种新冠状病毒抗体检测试剂盒、检测方法和用途。

本发明的一个目的所采用的技术方案为：

一种新冠状病毒抗体检测试剂盒，包括R1试剂、R2试剂、磁微粒试剂和化学发光底物。

进一步的，还包括质控剂和用于校准曲线的校准剂；所述校准剂和质控剂均为缓冲液。

进一步的，所述R2试剂中含有浓度为0.05-1μg/mL的碱性磷酸酶标记的链酶亲合素。

进一步的，所述R1试剂中含有浓度为0.05-2μg/mL的Biotin标记的2019-nCoV抗原复合物。

进一步的，还包括用于配制清洗液的清洗浓缩液。

进一步的，所述磁微粒试剂中含有浓度为0.05-5μg/mL的包被有Anti-human IgM抗体的磁微粒。

进一步的，所述化学发光底物为3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3- 磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐。

本发明的另一个目的采用的技术方案为：

一种新冠状病毒抗体检测方法，包括步骤：以N蛋白和S蛋白的融合蛋白作为检测的复合物，使用磁微粒化学发光法，通过SA级联放大对新冠状病毒抗体检测。

进一步的，所述的一种新冠状病毒抗体检测方法，包括步骤：

生成复合物：包被有Anti-human IgM抗体的磁微粒、样本中的新冠状病毒抗体以及生物素标记的抗原三者反应，得到含有复合物的混合物；