[发明专利]一种犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法

权利要求书

1.一种犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤100：制备20nm胶体金溶液；

步骤200：胶体金标记；

步骤300：对膜材进行处理；

步骤400：对T，C线进行包被；

步骤500：将成品进行包装。

2.根据权利要求1所述的犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，步骤100包括如下步骤：

步骤101：取洁净的250ml三角烧瓶1个，加入100ml浓度为0.01％的氯金酸双蒸水溶液,加热煮沸，迅速加入1％柠檬酸三钠溶液继续煮沸8分钟，自然冷却至室温，蒸发的水量用双蒸水不足；

步骤102：透射电镜鉴定胶体金颗粒呈圆形大小均一无聚集为合格，置棕色玻璃瓶密闭避光保存。

3.根据权利要求1所述的犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，步骤200包括如下步骤：

步骤201：CPV单抗3G8透析除盐；

步骤202：在100ml胶体金溶液中加入0.2M碳酸钾溶液调PH至7.40，搅拌均匀，边加边搅拌，逐滴加入除盐后的CPV单抗3G8 1.4mg，加完继续搅拌5分钟后静置15分钟；

步骤203：再加入10％的BSA10ml，搅拌10分钟后静置15分钟，4摄氏度12000转离心45分钟，弃上清；

步骤204：加入0.01mmol/L含1％BSA的PB液，搅拌均匀，4摄氏度过夜；

步骤205：在4摄氏度10000转离心45分钟，弃上清，用重悬液重悬至原体积1/10。

4.根据权利要求1所述的犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，步骤300包括如下步骤：

步骤301：样品垫的处理：玻纤样品垫用含1％S17的PH7.0的PBS处理15分钟，65摄氏度干燥箱烘干10小时；

步骤302：金垫的处理：用金垫处理液浸聚酯纤维膜15分钟，45摄氏度干燥箱4小时烘干；

步骤303：以5ul/cm，10cm/s将重悬后的金标单抗喷于处理后的金垫，45摄氏度烘干2小时。

5.根据权利要求1所述的犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，步骤400包括如下步骤：

步骤401：CPV单抗9E7和羊抗鼠用含2％蔗糖PH7.2，10mmol/L的PBS分别稀释至1mg/ml和1.5mg/ml浓度；

步骤402：将135s的NC膜贴于PVC板上，用划膜仪将CPV单抗9E7和羊抗鼠以1ul/cm和10cm/s包被。

6.根据权利要求1所述的犬细小病毒胶体金快速检测试剂盒的制作方法，其特征在于，步骤500包括如下步骤：

步骤501：将吸水纸压住NC膜1mm贴在PVC板上；

步骤502：将制作好的金标垫压在NC膜上1mm贴在PVC板上；

步骤503：将处理后的样品垫压在金标垫上1mm贴在PVC板上；

步骤504：用切条机将制作好的大板切成4mm宽的试纸条,将试纸条装入卡壳,与干燥剂装入铝箔袋密封；

步骤505：配制样品稀释液分装于稀释液管内，每管稀释液与试剂盒一起组成一份检测试剂；

步骤506：做特异性与灵敏度测试准予合格。