[发明专利]检测2019新型冠状病毒核酸的试剂盒有效
申请号: | 202010286936.0 | 申请日: | 2020-04-13 |
公开(公告)号: | CN111455106B | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 王涛;刘思华;黄梦倩;徐亚楠;王志云 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 2019 新型 冠状病毒 核酸 试剂盒 | ||
本发明公开了检测2019新型冠状病毒核酸的试剂盒,包括:检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA‑1或检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA‑2、LbCas12a核酸酶、核酸检测探针、引物对以及DNA Amplification试剂盒、水和1×NEbufferTM2.1;本发明的检测2019新型冠状病毒核酸的试剂盒,能够快速、准确地对2019新型冠状病毒核酸进行检测,具有检测特异性好、灵敏度高、可在室温下实现高灵敏检测、操作方便、快捷的优点。
技术领域
本发明属于分子生物学技术领域。更具体地,涉及检测2019新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸的试剂盒。
背景技术
2019新型冠状病毒是一种新发现的冠状病毒新毒株,可引起人新型冠状病毒性肺炎,以发热、乏力、干咳为主要表现,严重者可快速进展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和凝血功能障碍。目前,临床诊断主要依据流行病学、临床表现、实验室检查等。
目前,在对2019新型冠状病毒检测中,金标准仍是实时荧光定量PCR(Real-time-PCR,RT-PCR)检测技术,其灵敏度和特异性都较高。使用实时荧光PCR检测,单是实时荧光PCR检测一般需要两小时左右。整个检测过程还包括采样、处理样本等步骤,通常总时长大于两小时。该方法的主要缺点在于检测花费时间长,进行PCR检测时需要依赖PCR仪或昂贵的实时定量PCR仪及其它多种配套设备。在新冠病毒检测中,RT-PCR方法出现较多假阴性结果,影响了对疫情的判断和防控。
因此亟需一种不需要昂贵的仪器,低成本的,并能够快速、准确地检测2019新型冠状病毒的灵敏度高的试剂盒。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足,提供检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-1。
本发明的第二个目的是提供检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-2。
本发明的第三个目的是提供检测2019新型冠状病毒核酸的试剂盒。
本发明的技术方案概述如下:
检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
检测2019新型冠状病毒核酸的试剂盒,包括:检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-1或检测2019新型冠状病毒核酸的crRNA-2、LbCas12a核酸酶、核酸检测探针、引物对以及DNAAmplification试剂盒、水和1×NEbufferTM2.1;
所述核酸检测探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
所述引物对包括上游引物和下游引物;
所述上游引物为第一上游引物、第二上游引物、第三上游引物、第四上游引物或第五上游引物;
所述第一上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;
所述第二上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;
所述第三上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示;
所述第四上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示;
所述第五上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;
所述下游引物为第一下游引物、第二下游引物、第三下游引物、第四下游引物或第五下游引物;
所述第一下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示;
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