[发明专利]参附注射液指纹图谱的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种参附注射液指纹图谱的构建方法，包括将参照品和参附注射液供试品分别进行超高效液相色谱分析，得到参附注射液指纹图谱；

其中超高效液相色谱的分析条件为：采用反向填料色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A包括水，流动相B包括乙腈，流动相A在19min内从80±5％v/v降至10±5％v/v，流动相B在19min内从20±5％v/v升至90±5％v/v；流动相流速为0.3～0.5mL/min，检测波长为200～210nm。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，浓度梯度洗脱程序为：

流动相A：0～3min由80±5％v/v降至78±5％v/v；3～6min降至70±5％v/v；6～7min，降至68±5％v/v；7～9min为68±5％v/v；9～11min降至50±5％v/v；11～12min降至45±5％v/v；12～17min降至10±5％v/v；17～19min为10±5％v/v；

流动相B：0～3min由20±5％v/v升至22±5％v/v；3～6min升至30±5％v/v；6～7min升至32±5％v/v；7～9min为32±5％v/v；9～11min升至50±5％v/v；11～12min升至55±5％v/v；12～17min升至90±5％v/v；17～19min为90±5％v/v；

优选地，浓度梯度洗脱程序为：

流动相A：0～3min由80±1％v/v降至78±1％v/v；3～6min降至70±1％v/v；6～7min，降至68±1％v/v；7～9min为68±1％v/v；9～11min降至50±1％v/v；11～12min降至45±1％v/v；12～17min降至10±1％v/v；17～19min为10±1％v/v；

流动相B：0～3min由20±1％v/v升至22±1％v/v；3～6min升至30±1％v/v；6～7min升至32±1％v/v；7～9min为32±1％v/v；9～11min升至50±1％v/v；11～12min升至55±1％v/v；12～17min升至90±1％v/v；17～19min为90±1％v/v；

更优选地：浓度梯度洗脱程序为：

流动相A：0～3min由80％v/v降至78％v/v；3～6min降至70％v/v；6～7min，降至68％v/v；7～9min为68％v/v；9～11min降至50％v/v；11～12min降至45％v/v；12～17min降至10％v/v；17～19min为10％v/v；

流动相B：0～3min由20％v/v升至22％v/v；3～6min升至30％v/v；6～7min升至32％v/v；7～9min为32％v/v；9～11min升至50％v/v；11～12min升至55％v/v；12～17min升至90％v/v；17～19min为90％v/v。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，流速为0.35～0.45mL/min，优选为0.4mL/min；

优选地，检测波长为200～205nm，优选为203nm；

优选地，柱温为35～45℃，优选为38～42℃，更优选为40℃；

优选地，反向填料色谱柱型号包括Waters shield BEH RP-18。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，理论塔板数按人参皂苷Rg1峰计算不低于30000。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述参照品为包括如下成分的溶液：人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2和人参皂苷Rd；

优选地，所述溶液的溶剂包括甲醇或乙腈；

优选地，参照品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2和人参皂苷Rd的浓度分别独立的为90～110μg/mL；优选为100μg/mL；

优选地，所述参附注射液供试品为参附注射液的续滤液。