[发明专利]红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法

说明书

本发明公开了一种红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，属于分析检测技术领域。本发明通过利用高效液相色谱串联质谱(LC‑MS/MS)，建立了红心鸭蛋中紫衫紫素的定量检测方法。其中，红心鸭蛋样品用乙腈提取后，经旋转蒸发浓缩，正己烷脱脂后上机测定。结果表明本方法操作简单、灵敏度高且准确性好，为测定红心鸭蛋中的紫衫紫素提供方法参考，在红心鸭蛋加工生产和品质分级等领域具有极大的应用潜力和经济价值。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，尤其涉及红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法。

背景技术

天然红心鸭蛋的蛋黄呈朱砂红色，色泽稳定、自然，在市场上深受消费者喜爱。普通蛋黄的黄色色素主要由叶黄素、玉米黄质、新黄质、紫黄质等黄色类胡萝卜素组成，其来源为饲料中谷物类粮食或绿色植物中的黄色类胡萝卜素。而根据有关研究，蛋鸭通过放养或给饲新鲜菹草可以生产出天然红心鸭蛋，天然红心鸭蛋中的含有一种名为紫衫紫素(Rhodoxanthin)的红色类胡萝卜素，其分子式为C₄₀H₅₀O₂，结构式见图1。有研究显示，紫衫紫素对人体具有抗氧化、清除自由基、增强免疫、抑制肿瘤的发生等作用。随着生活水平的提高，天然绿色食品的保健功能越来越受到人们的重视，因此对天然红心鸭蛋中的紫衫紫素的研究具有重要意义。目前有关天然红心鸭蛋中的紫衫紫素的检测定量方法并未见有报道。

因此，开发一种可以准确定量红心鸭蛋中紫衫紫素的分析检测方法就成为了本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供利用高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)建立的红心鸭蛋中紫衫紫素的准确定量方法。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，具体步骤包括：

I、标准溶液配制

精密称取紫衫紫素标准品并用少量二氯甲烷溶解，再用乙腈定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL的标准储备液，-20℃保存，用时根据具体情况用乙腈稀释成适当浓度的系列标准工作溶液；

II、样品前处理

准确称取均质样品于离心管中，加入有机溶剂及无水硫酸钠后，涡旋混匀、超声提取、离心分离，将上清液转移至旋转蒸发瓶中，对离心管中的残渣每次用有机溶剂重复提取两次，合并三次收集的有机溶剂相，加入正丙醇，于40℃旋转蒸发浓缩至干，用5mL有机溶剂溶解并转移至15mL离心管中，加入3mL正己烷，涡旋、离心分离，弃去上层正己烷相，下层有机溶剂相过0.22μm滤膜后，上机分析；

III、液相色谱条件

色谱柱：Shim-pack XR-ODSⅢ(1.6μm,2.0mm×75mm)色谱柱；柱温40℃；进样量5μL；流动相A:5mmol/L乙酸铵或水，流动相B:乙腈；流速0.3mL/min梯度洗脱程序如表1；

IV、质谱条件

电喷雾离子源(ESI)，正离子模式扫描，多反应检测模式(MRM)，气帘气(CUR)35.0psi；碰撞气压Medium，雾化器(GS1)55.0psi，辅助加热器(GS2)50.0psi,离子源电压(IS)5500V，辅助加热器温度(TEM)600℃；其它条件见表2，其中*标注的碎片离子为定量离子。

表1

表2

优选的，所述步骤II中的有机溶剂包括二氯甲烷、乙腈和丙酮。

进一步优选的，所述步骤II中的有机溶剂为乙腈。