[发明专利]红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法

权利要求书

1.红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于，具体步骤包括：

I、标准溶液配制

精密称取紫衫紫素标准品并用少量二氯甲烷溶解，再用乙腈定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL的标准储备液，-20℃保存，用时根据具体情况用乙腈稀释成适当浓度的系列标准工作溶液；

II、样品前处理

准确称取均质样品于离心管中，加入有机溶剂及无水硫酸钠后，涡旋混匀、超声提取、离心分离，将上清液转移至旋转蒸发瓶中，对离心管中的残渣每次 用有机溶剂重复提取两次，合并三次收集的有机溶剂相，加入正丙醇，于40℃旋转蒸发浓缩至干，用5mL有机溶剂溶解并转移至15mL离心管中，加入3mL正己烷，涡旋、离心分离，弃去上层正己烷相，下层有机溶剂相过0.22μm滤膜后，上机分析；

III、液相色谱条件

色谱柱：Shim-pack XR-ODS Ⅲ色谱柱；柱温40℃；进样量5μL；流动相A:5mmol/L乙酸铵或水，流动相B:乙腈；流速0.3mL/min梯度洗脱程序如表1；

IV、质谱条件

电喷雾离子源ESI，正离子模式扫描，多反应检测模式MRM，气帘气CUR 35.0psi；碰撞气压Medium，雾化器GS1 55.0 psi，辅助加热器GS2 50.0 psi,离子源电压IS 5500V，辅助加热器温度TEM 600℃；其它条件见表2，其中*标注的碎片离子为定量离子；

表1

表2

所述步骤II中的有机溶剂为二氯甲烷、乙腈或丙酮。

2.根据权利要求1所述的红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于，所述步骤II中的有机溶剂为乙腈。

3.根据权利要求2所述的红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于，所述步骤II样品前处理的具体参数为：准确称取均质样品5.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈及5g无水硫酸钠后，涡旋混匀1min，超声提取15min，再以4000r/min离心5min，将上清液转移至100mL旋转蒸发瓶中；对离心管中的残渣每次用20mL乙腈再重复提取两次，合并三次收集的乙腈相，加入5mL正丙醇，于40℃旋转蒸发浓缩至干，用5mL乙腈溶解并转移至15mL离心管中，加入3mL正己烷，涡旋1min，以4000r/min离心5min，弃去上层正己烷相，下层乙腈相过0.22μm滤膜后，上机分析。

4.根据权利要求1所述的红心鸭蛋中紫衫紫素的高效液相色谱串联质谱测定方法，其特征在于，所述步骤III中的流动相为5mmol/L乙酸铵-乙腈。