[发明专利]携载miRNA的VB12结合型纳米复合物的合成方法及应用

权利要求书

1.一种维生素B12结合型纳米载体的合成方法，包括：

1)将PLGA-PEG纳米载体、维生素B12、EDC和DMAP混合溶解在无水溶剂A中，15～40℃下搅拌反应；

2)反应完成后，透析、去除溶剂得到维生素B12结合型纳米载体，记为VB12-PLGA-PEG纳米载体；

3）将VB12-PLGA-PEG、DC-胆固醇分散在无水溶剂D中，搅拌至无沉淀，得到VB12-PLGA-PEG分散液；在VB12-PLGA-PEG分散液中加入聚乙烯醇和miRNA mimics的混合液，搅拌反应；反应结束后，用去离子水洗涤、过滤得到负载有miRNA mimics的VB12-PLGA-PEG纳米复合物，记为miRNA@PLGA-PEG-VB12纳米复合物；

所述无水溶剂A选自丁烯氧化物；

所述无水溶剂D选自无水氯仿；

PLGA-PEG纳米载体和维生素B12的摩尔比为1：（1～1.2）；

PLGA-PEG纳米载体：EDC：DMAP的摩尔比为1：（1～1.2）：（0.05～0.12）；

所述miRNA mimics为miR-532-3p mimics。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于：所述PLGA-PEG纳米载体的合成方法包括：

1)将PLGA、NHS和EDC在无水溶剂B中混合，活化，充分反应后，使用无水溶剂C洗涤去除未反应的小分子，干燥得到PLGA-NHS球团；其中，PLGA：NHS：EDC的摩尔比为1：（1-1.2）：（1-1.2）；

2)将PLGA-NHS球团溶解在无水溶剂D中，加入双官能团修饰的NH₂-PEG-COOH和二异丙基乙胺进行反应；

3)反应结束后，洗涤、干燥得到PLGA-PEG纳米载体。

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：所述无水溶剂B选自二氯甲烷。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：所述无水溶剂C为甲醇和乙醚的混合液。