[发明专利]基于细菌同步检测的双发射SiC/Au NPs荧光传感器的制备方法与应用

说明书

本发明提供一种基于细菌同步检测的双发射SiC/Au NPs荧光传感器及制备方法与应用，属于法医学技术领域。所述的双发射荧光传感器包括蓝色荧光的碳化硅量子点和红色荧光的金纳米簇，所述碳化硅量子点和金纳米簇在365nm激发下呈现440nm和660nm的两个发射峰值。本发明中双发射SiC/Au NPs荧光探针结合特异性抗菌肽，对口腔细菌有靶向结合作用；在靶菌存在的情况下，双发射SiC/Au NPs荧光探针溶液表现出明显的荧光淬灭，并且其荧光猝灭的程度与荧光试纸条在紫外灯下观察到的颜色变化趋势相对应；此外，该荧光传感器体系还应用于唾液样本中细菌的测量。

技术领域

本发明属于法医学技术领域，具体涉及一种基于细菌同步检测的双发射SiC/AuNPs荧光传感器的制备方法与应用。

背景技术

唾液斑是犯罪现场最常见的体液样本类型之一，尤其是在性侵犯事件中，可提供有力的证据来证明受害者与嫌疑人之间的联系。最常见的法医唾液鉴定方法，包括α-淀粉酶测试和ELISA技术。然而，测试结果并不总是令人满意。最近，口腔细菌的检测方法因简单有效被作为一种新型方法展开了一系列研究。口腔特异性细菌(如唾液链球菌，血链球菌和微黄奈瑟氏球菌)只存在于口腔中，被认为是法医唾液鉴定的新指标。Nakanishi等人最近报告了一项研究(H.Nakanishi,A.Kido,T.Ohmori,A.Takada,M.Hara,N.Adachi,K.Saito,Anovel method for the identification of saliva by detecting oral streptococciusing PCR,Forensic science international 183(1)(2009)20-23.)，他们采用基于PCR的方法，在模拟法医唾液样本中检出口腔细菌。Jung JY和同事使用real-time PCR和PCR结合免疫色谱条来检测细菌(J.Y.Jung,H.K.Yoon,S.An,J.W.Lee,E.R.Ahn,Y.J.Kim,H.C.Park,K.Lee,J.H.Hwang,S.K.Lim,Rapid oral bacteria detection based on real-time PCR for the forensic identification of saliva,Scientific Reports 8(1)(2018)10852.

J.W.Lee,Y.J.Ju,S.K.Lim,Simple and rapid identification of saliva bydetection of oral streptococci using direct polymerase chain reactioncombined with an immunochromatographic strip,Forensic Science InternationalGenetics 33(2018)155-160.)。其中一项重要发现是，他们发现模拟法医样本中的唾液链球菌和血链球菌与唾液密切相关，并且制定了唾液识别阳性的标准,即同时检测出两种或两种以上口腔细菌时，即可证明唾液阳性。

用经典检测方法(平板计数法)检测唾液样本中的口腔细菌需要相对长的时间(1-3天)。相对快速替代的方法，如免疫测定或核酸(特别是PCR)(J.W.Law,N.S.Ab Mutalib,K.G.Chan,L.H.Lee,Rapid methods for the detection of foodborne bacterialpathogens:principles,applications,advantages and limitations,Frontiers inMicrobiology 5(770)(2015)770.)是识别细菌的有力技术，但仍需16-48小时的细菌培养以及复杂的样本前处理操作(H.Saida,N.S.H.J.A.Ytow,E.Microbiology,Photometricapplication of the Gram stain method to characterize naturalbacterialpopulations in aquatic environments,64(2)(1998)742-747.)。