[发明专利]一种从发酵液中提取色氨酸的方法有效
申请号: | 202010261304.9 | 申请日: | 2020-04-03 |
公开(公告)号: | CN111362860B | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 吴涛;王海雷;常利斌;龚华;李岩;赵津津;刘月明 | 申请(专利权)人: | 通辽梅花生物科技有限公司 |
主分类号: | C07D209/20 | 分类号: | C07D209/20 |
代理公司: | 内蒙古欣洋瑞专利代理有限公司 15110 | 代理人: | 刘彩霞 |
地址: | 028024 内蒙古自治区通辽市*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 提取 色氨酸 方法 | ||
1.一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,其包括如下步骤:(1)发酵液初结晶;(2)分离得一次晶体;(3)发酵液二次结晶;(4)获得色氨酸成品;其中,
(1)发酵液初结晶:进行发酵液结晶控制,通过改变发酵液的理化性质,使发酵液中的色氨酸更多的以晶体颗粒形态沉淀析出;具体操作为:发酵结束后,控制搅拌转速50~300转/min,进行等电结晶,具体为:将发酵液的pH调节至5.85~5.95,pH达到后维持15分钟,等电结晶温度为37-40℃;等电结晶后开始降温结晶,降温梯度为每小时降低2-5℃,直至温度为5-15℃,温度达到后维持30分钟;调节发酵液pH前,向发酵液中加入结晶助剂来改善发酵液的表面张力,所述结晶助剂的添加量为100~1000ppm;所述结晶助剂为脂肪酸甘油酯、脂肪醇酯、蔗糖酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯20或聚山梨酯80中的任意一种或一种以上的混合物;
(2)分离得一次晶体:将步骤(1)结晶出的色氨酸晶体从发酵液中分离出来,得到一次晶体;
(3)发酵液二次结晶:经步骤(2)分离出一次结晶后的发酵液进行二次结晶,得到二次晶体;具体操作步骤为:
I、经步骤(2)分离出一次结晶后的发酵液,调节pH至3.5~5.5,使可溶性蛋白沉降析出;
II、调节pH后的发酵液使用菌体分离设备将菌体细胞和沉降析出的蛋白一起分离去除,得到色氨酸的过滤清液;
III、过滤清液使用大孔吸附介质进行脱色,得到脱色清液;
IV、脱色清液进行蒸发浓缩,浓缩至色氨酸含量为140~180g/L,得到蒸发浓缩液;
V、蒸发浓缩液进行等电结晶,具体为:调节pH至5.85~5.95,等电结晶温度为55-65℃,得到初步结晶液;
VI、初步结晶液进行梯度降温,降温梯度为每小时降低2-5℃,直至温度为5-15℃,温度达到后维持30分钟,得到色氨酸结晶的晶浆液;
VII、对晶浆液进行离心分离,分离过程中加乙醇冲洗去除晶体表面的杂质,得到二次晶体,甩出的母液为一次母液;
(4)获得色氨酸成品:将所述一次晶体与所述二次晶体混合,干燥,粉碎后,得到符合国家标准的色氨酸成品。
2.根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,所述步骤(2)中使用分级过滤与离心沉降的方式,将色氨酸晶体从发酵液中分离出来,分离过程中加乙醇冲洗去除晶体表面的杂质。
3.根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,所述步骤II中使用的菌体分离设备为陶瓷膜或板框压滤机;所述步骤III使用的大孔吸附介质为活性炭,每100mL过滤清液中添加0.3~0.8g的所述活性炭,脱色温度为55~65℃,脱色时间30-60分钟;所述步骤IV中,蒸发温度控制在45-60℃,压力为-0.090~-0.099Mpa;所述步骤VI中梯度降温过程中,每小时温度降低2-5℃。
4.根据权利要求1或3所述的一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,将所述步骤VII中得到的一次母液蒸发浓缩后与饲料载体按比例混匀,烘干、粉碎,制得低含量的色氨酸产品。
5.根据权利要求4所述的一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,所述饲料载体为载体粉和钙盐,蒸发浓缩后一次母液、所述载体粉与所述钙盐的混合质量比例为:10∶1.2~1.8∶0.1~0.3。
6.根据权利要求5所述的一种从发酵液中提取色氨酸的方法,其特征在于,所述载体粉为玉米芯粉、玉米皮粉、玉米浆干粉、玉米碎粒或大豆皮粉中的任意一种或一种以上的组合;所述钙盐为碳酸钙、氧化钙、氢氧化钙、硫酸钙或氯化钙中的任意一种或一种以上的组合。
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