[发明专利]EGFRvIII和EGFR的双特异性人源抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种EGFRvIII和EGFR的双特异性人源抗体及其应用，涉及生物医药技术领域。本发明公开的人源抗体具有如SEQ ID NO.6‑8所示的轻链CDR和SEQ ID NO.11‑12所示的重链CDR。该人源抗体可以特异性结合人EGFR和EGFRvIII两种蛋白，具有较高的亲和力，且其为全人源抗体，具有更低的免疫原性，本发明为以EGFR为靶点的相关癌症的治疗提供了一种新的抗体选择。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及一种人EGFRvIII和EGFR的双特异性人源抗体及其应用。

背景技术

EGFR（epidermal growth factor receptor）是表皮生长因子受体（HER）家族成员之一。它是由原癌基因c-erbB1 编码的一种多功能跨膜糖蛋白，分子量约为170kD，由1186个氨基酸组成，分为胞内区、胞外区和跨膜区，EGFR人体内分布非常广泛，在哺乳动物上皮细胞、胶质细胞、成纤维细胞等细胞膜上均有表达，EGFR其它家族成员还包括HER2、HER3 和HER4。EGFR及其家族成员在细胞生长、增殖、分化、存活和迁移中均起着非常重要生理调控作用。

EGFR在多种肿瘤(如肺癌、乳腺癌、结肠癌、胃癌、脑癌、膀胱癌、头颈部肿瘤、卵巢癌、肾癌和前列腺癌)存在突变或高表达，与肿瘤发生、发展和恶性增值密切相关，并因此成为目前最为成功的肿瘤治疗靶点之一，适用于肺癌、消化道等多种肿瘤治疗。EGFR突变主要有四种形式，包括基因扩增、框内缺失、串联重复和点突变，EGFR突变体III（EGFR variantIII，EGFRvIII）最常见突变形式之一，成为神经系统肿瘤诊疗潜在靶点，也可见于多种类型肿瘤，目前为止，尚未在正常组织中检出EGFRvIII，EGFRvIII是相关肿瘤诊断的重要标识。特别是近年来，抗体药物治疗迅猛发展，业已成为肿瘤免疫治疗的重要工具，全球范围内，EGFR是热门靶点，至今已有多个EGFR抗体批准进入临床，包括西妥昔单抗、帕尼单抗、耐昔妥珠单抗和尼妥珠单抗，它们对肿瘤治疗适应症和应用呈上升态势，在这些上市的EGFR单抗中，只有帕尼单抗（Panitumumab）可以同时中和EGFRvIII和野生型EGFR抗体，减弱细胞内活化信号，具有显著的体外和体内肿瘤活性。但目前这些抗体中，不少抗体仍具有鼠源蛋白成分，易产生抗鼠抗体反应，反复应用时会影响效能，鉴于人源抗体药物发展大趋势，制备特色人源EGFR单克隆抗体，在EGFR靶向的免疫导向治疗中，则具有更好应用价值和前景。目前全人源抗体的获得仍不易。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种EGFRvIII和EGFR的双特异性人源抗体及其应用，本发明所提供的人源抗体可以特异性结合EGFR和EGFRvIII两种蛋白，具有较高的亲和力，且该抗体为全人源抗体，具有更低的免疫原性，为EGFR为靶点相关癌症治疗提供一种新的抗体选择。

除非另外定义，在此使用的所有技术术语、注释以及其他科学术语或科学术语是旨在具有本发明涉及领域普通技术人员所通常理解的含义。在一些情况中，为了清楚和/或为了便于引用在此定义了具有通常理解含义的术语，并且在此包括这类定义不必解释成表示与本领域通常理解的具有显著差异。在此说明或引用的许多技术和步骤被本领域普通技术人员良好地理解并且使用常规方法一般性地使用。除非另外说明，通常地根据制造商限定的实验方案和/或参数来执行涉及使用可商购的试剂盒和试剂的步骤。

一方面，本发明提供一种抗EGFR或EGFRvIII的全人源抗体或其抗原结合片段，所述人源抗体或其抗原结合片段均具有如SEQ ID NO.6-8所示的轻链CDR1、CDR2和CDR3，以及如SEQ ID NO.11-12所示的重链CDR1、CDR2和CDR3。