[发明专利]一种提升酰胺化反应用于制备蛋白质生物墨水的方法

权利要求书

1.一种提升酰胺化反应用于制备蛋白质生物墨水的方法，包括以下步骤：

(1)将碳酸盐和碳酸氢盐以质量比3-4:5-7加入蒸馏水中，得到0.8-1.2M的碳酸盐/碳酸氢盐缓冲溶液；

(2)将含有氨基的蛋白质材料溶于溶剂，调节pH值为7.0-8.0，加入步骤(1)中碳酸盐/碳酸氢盐缓冲溶液，然后滴加甲基丙烯酸酐，酰胺化反应，透析，冷冻，冷冻干燥，得到甲基丙烯酸修饰的蛋白质材料，其中含有氨基的蛋白质材料、碳酸盐/碳酸氢盐缓冲溶液和甲基丙烯酸酐的质量比为8:11.5:5.2；

(3)将步骤(2)中甲基丙烯酸修饰的蛋白质材料溶于溶剂，加入光引发剂、热引发剂或者与甲基丙烯酸修饰的蛋白质材料发生化学交联的其他材料，得到蛋白质生物墨水。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中碳酸盐和碳酸氢盐为碳酸钠和碳酸氢钠或者碳酸钾和碳酸氢钾。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中含有氨基的蛋白质材料来源于动物组织；含有氨基的蛋白质材料包括脱细胞基质、胶原或明胶；溶剂包括酶溶液、酸溶液或者碱溶液。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中酰胺化反应温度为室温，酰胺化反应时间为12h-24h。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中溶剂为水或者胃蛋白酶的溶液；热引发剂包括偶氮类引发剂、有机过氧化物引发剂或无机过氧化物引发剂。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中光引发剂包括：2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮、1-羟基环己基苯基甲酮、2-甲基-2-(4-吗啉基)-1-[4-(甲硫基)苯基]-1-丙酮、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2,4,6-三甲基苯甲酰基-二苯基氧化膦或者2-羟基-2-甲基-1-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-1-丙酮。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中与甲基丙烯酸修饰的蛋白质材料发生化学交联的其他材料包括含巯基或者二硫键的氨基酸、蛋白质或者含有不饱和键的高分子。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中蛋白质生物墨水可以与细胞混合制备生物墨水。

9.一种如权利要求1所述方法制备得到的蛋白质生物墨水。

10.一种如权利要求1所述方法制备得到的蛋白质生物墨水的应用。