[发明专利]用于检测鼻咽癌中EB病毒的引物、探针及试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测鼻咽癌中EB病毒的引物、探针及试剂盒，属于基因融合检测技术领域，本发明利用数字PCR油包水的反应，设计了4条特异性修饰引物和2个荧光探针，以及包含上述引物和探针的试剂盒。该引物、探针及试剂盒适用于数字PCR技术，能够有效检测出样品中的EB病毒，其最低检出限可达到1copies/ml，且特异性高，适用于常规样品的检测，也适用于血浆或甲醛固定石蜡包埋的样品所获得的短片段DNA的检测，对于鼻咽癌的早期预防、诊断都具有积极的指导意义和应用价值。

技术领域

本发明属于基因融合检测技术领域，具体涉及一种用于检测鼻咽癌中EB病毒的引物、探针及试剂盒。

背景技术

鼻咽癌是指发生于鼻咽腔顶部和侧壁的恶性肿瘤。是我国高发恶性肿瘤之一，发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首。而EB病毒(Ep-stein-barr virus，EBV)与鼻咽癌密切相关，EB病毒具有在体内外专一性地感染人类及某些灵长类B细胞的生物学特性，主要通过唾液传播，检测EB病毒的相关抗原是诊断及监测患者病情变化的常用方法，主要有针对EB病毒的衣壳抗原(CA)、早期抗原(EA)和核抗原(EBNA)，但其敏感性和特异性较差。近年来，由于定量多聚酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)技术的发展，及在此基础上发展的数字PCR技术，直接定量检测血浆中的游离病毒DNA逐渐受到临床应用认可，但目前市面上还很少有基于数字PCR技术进行鼻咽癌中EB病毒的试剂盒，且普通荧光PCR检测普遍仍存在检测灵敏度不够高的问题。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种适用于数字PCR技术的高灵敏度和特异性的用于检测鼻咽癌中EB病毒的试剂盒。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：用于检测鼻咽癌中EB病毒的引物和探针，所述引物如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示，所述探针如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:6所示(见表1)。

本发明采用的另一种技术方案为：用于检测鼻咽癌中EB病毒的试剂盒，包括SEQID NO:1-SEQ ID NO:6所示的引物和探针。

表1