[发明专利]一种POLN基因突变位点检测试剂盒及其用途

说明书

本发明属于生物检测技术领域，涉及一种POLN基因突变位点检测试剂盒及其用途。所述的检测试剂盒包含扩增引物与延伸引物，所述的扩增引物的正向引物的序列如SEQ ID NO.3所示，所述的扩增引物的反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示，所述的延伸引物的序列如SEQ ID NO.5所示，所述的POLN基因的序列如SEQ ID NO.1所示，突变后的POLN基因的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的POLN基因突变位点检测试剂盒能够效率高、成本低的预测人员辐射敏感性。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，涉及一种POLN基因突变位点检测试剂盒及其用途。

背景技术

目前，放射疗法仍然是现代癌症治疗的主要手段，大约50％的癌症患者需要放射治疗。但是，接受相同剂量放射治疗，患者表现出的放射毒性不同：少数人没有明显的毒性作用，大多数人在临床上有轻度或中度的毒性反应，而少数人导致严重的正常组织并发症，甚至可能危及生命。因此，有必要寻找一种与放射敏感性相关的分子标志物用于预测患者是否为放射敏感性(或放射抗性)个体。

放射敏感性的预测是为了能够针对个别患者量身定制放射治疗方案以改善预后，从而一方面可以降低辐射剂量以降低对敏感个体的毒性，另一方面可以提高辐射剂量以使更多的抗辐射患者得到有效治疗。这将最大程度地控制肿瘤，同时最大程度地减少对患者的正常组织的损害。此外，在我国大约有20万的放射工作人员，放射工作人员在日常工作时要长期接受职业照射，对放射工作人员进行放射敏感性的预测有助于预防和减少职业伤害。

POLN rs2022302位点位于4号染色体2174006处，等位基因为AG，该位点所在基因是编码DNA聚合酶A型家族成员。编码的蛋白质在DNA修复和同源重组中起作用。

单核苷酸多态性标记(SNP)是“第三代DNA遗传标记”，在人类基因组中存在300万个，被认为是应用前景最好的遗传标记物。SNP可以真实反映遗传差异，并与正常组织中辐射诱发的毒性有关。

此外，基质辅助激光解吸电离质谱技术与传统的以测序和杂交原理为主的基因检测方法相比，在检测效率、检测通量、检测敏感性、检测精确性、检测可重复性、检测费用等方面都具有无可比拟的优势。该技术可实现384个样本同时检测，每个检测点检测只需3-5s时间，可检测pmol级，准确度达98％以上。因此，利用基质辅助激光解吸电离质谱法进行辐射敏感性判断能够快速、准确、高通量、低成本的预测人员辐射敏感性。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种POLN基因突变位点检测试剂盒，以能够效率高、成本低的预测人员辐射敏感性。

为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种POLN基因突变位点检测试剂盒，所述的检测试剂盒包含扩增引物与延伸引物，

所述的扩增引物的正向引物的序列如SEQ ID NO.3所示，所述的扩增引物的反向引物的序列如SEQ ID NO.4所示，

所述的延伸引物的序列如SEQ ID NO.5所示，

所述的POLN基因的序列如SEQ ID NO.1所示，所述的突变位点为POLN基因的rs2022302位点(A到G的突变)，突变后的POLN基因的序列如SEQ ID NO.2所示。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种POLN基因突变位点检测试剂盒，其中所述的扩增引物的正向引物的浓度为2-3μM。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种POLN基因突变位点检测试剂盒，其中所述的扩增引物的反向引物的浓度为2-3μM。

在一种优选的实施方案中，本发明提供一种POLN基因突变位点检测试剂盒，其中所述的延伸引物的浓度为3.5-4.5μM。