[发明专利]去势抵抗型前列腺癌诊断和/或预后评估标志物LncRNA ZNF518A及其应用

说明书

本发明涉及分子生物学技术领域，具体是去势抵抗型前列腺癌诊断或预后评估标志物LncRNA ZNF518A及其应用。本发明实验结果表明LncRNA ZNF518A有miR‑101‑3P及AR的结合位点；miR‑101‑3P也可与AR‑V7 3‑’UTR结合，且经荧光素酶报告基因验证了该结果，由此发现LncRNA ZNF518A通过竞争性结合miR‑101‑3P调控AR‑V7的表达，进而促进CRPC的发生发展。优点：本发明通过检测LncRNA ZNF518A表达及AR‑V7荧光免疫化学检测双重检测增加了临床应用的可行性和可信度，能够直接应用于临床，这是目前其他分子生物学检测方法不能比拟的特点。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体地说，是去势抵抗型前列腺癌诊断或预后评估标志物LncRNA ZNF518A及其应用。

背景技术

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是欧美男性最常见及致死性最高的恶性肿瘤之一(Siegel RL,Miller KD,Jemal A.Cancer statistics,2015.CA Cancer J Clin 2015；65(1):5-29)。在我国北京、上海等大城市，前列腺癌也已成为男性泌尿生殖系统最常见肿瘤，且大多患者初发即为晚期(Chen W,Zheng R,Baade PD,Zhang S,Zeng H,Bray F,etal.Cancer statistics in China,2015.CA Cancer J Clin 2016,66(2):115-32，叶定伟,朱耀.中国前列腺癌的流行病学概述和启示.中华外科杂志2015；53(4):249-52)。对于晚期前列腺癌，临床多采取抗雄治疗，但绝大部分患者在抗雄治疗18个月后进展为去势抵抗型前列腺癌(Castration-resistant prostate cancer，CRPC)。

在CRPC发生的众多机制中，AR剪接变异体被认为在CRPC的发生发展进程中扮演着十分重要的作用，新英格兰杂志发表的研究证实，AR-V7是激素依赖型前列腺癌进展为CRPC的重要因素(Antonarakis ES,Lu C,Wang H,Luber B,Nakazawa M,Roeser JC,et al.AR-V7 and resistance to enzalutamide and abiraterone in prostate cancer.N Engl JMed 2014；371(11):1028-38)。

据研究，长链非编码RNA(Long non-coding RNA，LncRNA)可作为一种竞争性内源性RNA(competing endogenous RNA，ceRNA)，通过吸附(sponge effect)miRNA参与靶基因的表达调控，从而在肿瘤的发生发展中发挥重要作用(Wang Y,Xu Z,Jiang J,Xu C,KangJ,Xiao L,et al.Endogenous miRNA sponge lincRNA-RoR regulates Oct4,Nanog,andSox2 in human embryonic stem cell self-renewal.Dev Cell 2013；25(1):69-80)，然而关于LncRNA ZNF518A在前列腺癌发生发展中的作用尚无相关报道。我们通过临床标本和细胞实验研究发现，ZNF 518A的基因表达与前列腺癌恶性程度及转移复发呈高度相关性，ZNF 518A不但可以通过与AR直接作用，更重要的是ZNF 518A与AR异构体(如AR-V7)的表达呈高度正相关，与全长AR相比，AR-V7缺少C端配体结合区，并可自主进入胞核内并持续激活AR信号通路，促进下游基因的转录从而刺激前列腺癌细胞的增殖，在很大程度上诱导前列腺癌的激素去势抵抗。

所以，联合检测ZNF 518A及雄激素受体异构体AR-V7，是建立在LncRNA ZNF518A通过本专利证明的遗传调控机制的基础上。即LncRNA ZNF518A通过竞争性结合miR-101-3P调控AR-V7的表达，进而促进CRPC的发生发展。