[发明专利]基于二维材料碳化钛Mxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法

说明书

本发明公开了基于二维材料碳化钛Mxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法，特点是包括将氨基化Fesubgt;3/subgt;Osubgt;4/subgt;纳米颗粒与食源性致病菌第一抗体连接制备的捕获单元的步骤；将纳米金棒分散碳化钛MXene薄层中，然后与N‑(4‑氨丁基)‑N‑乙基异鲁米诺和食源性致病菌第二抗体反应获得信号单元的步骤；最后依次将捕获单元、待测食源性致病菌溶液以及信号单元滴涂在电极上，得到基于二维材料Tisubgt;3/subgt;Csubgt;2/subgt;Tsubgt;x/subgt; Mxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的步骤，优点是灵敏度和特异性高、检测结果可靠、步骤简单以及检测速度快。

技术领域

本发明涉及电化学发光免疫传感器及其检测方法，尤其是涉及基于二维材料碳化钛(Ti₃C₂T_x)Mxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法及其应用。

背景技术

食源性致病菌是指可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌。食品在采集、加工、运输等环节中很容易受到食源性致病菌的污染，因之而起的食物中毒和疾病爆发事件频频发生。常见的食源性致病菌有：副溶血性弧菌、创伤弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌等，传统检测食源性致病菌的方法为生化培养鉴定法，此法步骤繁琐，检测周期长，耗时费力。随着分子生物学技术快速发展，聚合酶链式反应(PCR)、DNA杂交和环介导等温扩增(LAMP)、生物芯片等方法也被应用于检测食源性致病菌，获得了较好的准确度和灵敏度，但在实际应用中也存在不少问题：假阳性几率偏高、仪器昂贵、检测成本高、检测步骤复杂、检测时间长等。因此，开发灵敏、准确、简便、快速的食源性致病菌检测方法，是迫切需求。其中弧菌是一种带一鞭毛的革兰氏阴性菌，广泛分布于河口、海湾、近岸海域的海水和海洋动物体内。副溶血性弧菌和创伤弧菌是是主要对人类具有潜在的致病性的弧菌。副溶血性弧菌的致病率高，而创伤弧菌致死率高。创伤弧菌是一种喜盐、喜碱、河口水域的天然致病菌，对患有免疫系统疾病、肝脏疾病或血色素沉着症的人构成严重的健康威胁。创伤性创伤弧菌通过伤口感染或食用生的贝类进入人体宿主，在易感人群中，感染常常发展为败血症和死亡。

电化学免疫传感器将电化学传感技术与免疫分析技术相结合，既有电化学传感器的灵敏、简便、快速、经济等优点，又有免疫分析的专一性和准确性等特点。近年来，各种纳米材料尤其是二维纳米材料如石墨烯、石墨相碳化氮(g-C₃N₄)等，在传感器构建方面应用广泛。2011年美国德雷塞尔大学有研究人员发现一种新型二维材料MXenes。它是二维过渡金属碳化物、氮化物或碳氮化物，不仅具有高导电性，大比表面积，而且表面具有大量的功能化基团，可以结合大量信号物质。Ti₃C₂T_x是目前研究最成熟的MXenes材料。目前，国内外还没有关于基于新型二维材料Ti₃C₂T_x MXenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法的相关研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种灵敏度和特异性高、检测结果可靠、步骤简单以及检测速度快的基于二维材料碳化钛Mxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法及其应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种基于二维材料Ti₃C₂T_xMxenes检测食源性致病菌的电化学发光免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备捕获单元(Ab₁-NH₂-Fe₃O₄)