[发明专利]一株可产高活力褐藻胶裂解酶的勒克氏菌及其应用

权利要求书

1.一株勒克氏菌，分类命名为Leclercia sp.，其特征在于，该菌株是从取自黄海的腐烂的海带中分离得到的，其能够产高活力的褐藻胶裂解酶，该菌株已于2019年4月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No. M 2019313。

2.采用权利要求1所述的勒克氏菌制备褐藻寡糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将权利要求1所述的菌株在选择性固体培养基上进行活化；

步骤2：取活化后的菌种数环，转接到种子培养基中，30℃、200-260rpm培养24h，得到种子液；

步骤3：按2-5%的接种量将种子液接入到发酵培养基中，30℃、200-260rpm培养33h，得到发酵液；

步骤4：将发酵液加入到海藻混悬液中，40℃水浴中酶解24-48h，然后升温至120℃，灭活1h，得初解溶液；

海藻混悬液由铜藻粉末和水混合而成，其中，铜藻粉末过40-60目筛；

步骤5：将初解溶液依次进行膜过滤、浓缩、冷冻干燥，制得褐藻寡糖。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤1中，所用到的选择性固体培养基是以海藻酸钠为唯一碳源的，其配方为：

海藻酸钠5g/L，硫酸铵5g/L，硫酸镁1g/L，磷酸氢二钾2g/L，硫酸亚铁0.01g/L，琼脂20g/L，自来水配制。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤2中，所用到的种子培养基的配方为：

葡萄糖5g/L，蛋白胨5g/L，酵母浸粉10g/L，海水配制。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤3中，所用到的发酵培养基的配方为：

葡萄糖3g/L，海藻酸钠3g/L，蛋白胨3g/L，酵母浸粉6g/L，自来水配制。