[发明专利]间充质干细胞免疫功能检测方法

说明书

本发明提供一种间充质干细胞免疫功能检测方法，包括以下步骤：(1)将脐带间充质干细胞与外周血单个核细胞共培养，得到待测样本；(2)检测待测样本中淋巴细胞的增殖活性及淋巴细胞亚群的比例，该间充质干细胞免疫功能检测方法适用于非诊断目的。本发明实施例所提供的间充质干细胞免疫功能检测方法将间充质干细胞与人外周血单个核细胞进行共培养，得到待测样本，通过对待测样本中的淋巴细胞亚群的比例和淋巴细胞的增殖活性的检测来评价间充质干细胞的免疫调节能力。如果淋巴细胞亚群的比例、和淋巴细胞增殖的变化量越大，说明该间充质干细胞的免疫功能更强、质量更好。

技术领域

本发明涉及干细胞应用技术领域，尤其是涉及一种间充质干细胞免疫功能检测方法。

背景技术

间充质干细胞最初在上世纪70年代首先从骨髓中分离出来的一群细胞。后来人们经过研究发现，这种细胞具有多向分化潜能，在一定的诱导培养条件下能分化成为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞等，这些细胞经过体外长期培养和多次传代后依然能保持分化潜能。由于其能够分化成为多种中胚层来源的间质细胞，故称之为间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)。上世纪90年代人们又从人脐带组织中分离出间充质干细胞，经过研究发现脐带间充质干细胞符合国际细胞治疗协会(international societyfor cellular therapy，ISCT)对间充质干细胞的定义。脐带间充质干细胞能够贴壁生长，高表达CD73、CD105、CD90等阳性细胞表面标志物，几乎不表达CD34、CD45、HLA-Dr等阴性细胞表面标志物。

随着研究的深入，人们发现间充质干细胞不仅具有多向分化潜能，还具有一定的疾病治疗潜能。目前在许多动物实验中已经发现，将间充质干细胞移植到疾病小鼠模型后，疾病症状能得到明显改善，其中包括糖尿病、支气管肺发育不良、早发性卵巢功能不全等疾病。除动物实验外，在一些临床治疗中也发现间充质干细胞对糖尿病、系统性红斑狼疮等一些免疫系统疾病也具有一定的疗效。机理研究发现间充质干细胞其不仅具有多向分化的潜能，更重要的是它具有其它干细胞不具有的免疫抑制和免疫调节能力。然而，对于间充质干细胞而言，还未发现有一种能够高效检测其免疫功能的方法。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种高效检测间充质干细胞免疫功能的检测方法。

第一方面，本发明的一个实施例提供了一种间充质干细胞免疫功能检测方法，包括以下步骤：

(1)将间充质干细胞与人外周血单个核细胞共培养，得到待测样本；

(2)检测待测样本中淋巴细胞的增殖活性及淋巴细胞亚群的比例；

间充质干细胞免疫功能检测方法适用于非诊断目的。

其中，淋巴细胞亚群是将淋巴细胞根据其免疫效应的不同分为不同的淋巴细胞亚群，包括诸如但不仅限于辅助性T淋巴细胞(Th)、细胞毒性T淋巴细胞(Tc/CTL)、调节性T淋巴细胞(Treg)、抑制性T淋巴细胞(Ts)、迟发型超敏反应性T淋巴细胞(TDTH)。间充质干细胞可以是包括但不限于脐带、脂肪、胎盘、骨髓等来源的间充质干细胞。

本发明实施例的间充质干细胞免疫功能检测方法至少具有如下有益效果：

本发明实施例提供了一种间充质干细胞免疫功能检测方法，将间充质干细胞与外周血单个核细胞进行共培养，得到待测样本，通过对待测样本中的淋巴细胞亚群的比例和淋巴细胞的增殖活性的检测来评价间充质干细胞的免疫调节能力。如果淋巴细胞亚群的比例和淋巴细胞增殖的变化量越大，说明该间充质干细胞的免疫功能更强、质量更好。

根据本发明的一些实施例的间充质干细胞免疫功能检测方法，淋巴细胞亚群选自Treg细胞、Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞。采用上述不同的淋巴细胞亚群作为检测间充质干细胞的免疫功能的标准从而实现对其免疫功能更准确的判断。