[发明专利]一种具有生物诱导成矿作用的嗜酸真菌的分离与鉴定方法

说明书

本发明提供一种具有生物诱导成矿作用的嗜酸真菌的分离与鉴定方法，包括以下步骤：S1从铅锌矿尾矿酸性底泥中获得纯培养的嗜酸真菌，鉴定其菌落形态并确定菌种的分类学地位；S2以铅锌矿尾矿酸性废水作为培养液培养嗜酸真菌，分析嗜酸真菌在酸性环境中的代谢潜能。采用本发明的分离鉴定方法可以有效的分离鉴定从出铅锌矿尾矿酸性底泥分离出的嗜酸真菌的诱导成矿能力。

技术领域

本发明属于微生物分离技术领域，具体涉及一种具有生物诱导成矿作用的嗜酸真菌的分离与鉴定方法。

背景技术

矿山酸性环境主要包括矿山酸性废水(acid mine drainage,AMD)、底泥(sediment)和生物膜(biofilm)等，是在人类的采矿等生产活动中产生的。采矿活动产生的大量不可利用的残渣，即尾矿(tailings)，以及含矿物成分比较低的矿石(贫矿)等，往往被露天堆积存放，或者通过表层覆土(或者淹水)来进行处理；于是通过自发的或者是微生物介导的化学过程，则有可能形成多种多样的矿山酸性环境。

AMD主要是由黄铁矿(pyrite，FeS₂)和其它金属硫化物暴露在大气及水中氧化溶解后生成的。AMD及其相关环境具有极低的pH、高重金属浓度和高硫酸盐浓度的特征，对AMD环境中微生物的研究有利于我们揭示微生物在AMD产生过程中的作用，从而寻找合适的对策来抑制或减少AMD的产生。AMD环境中也存在一些可以提高pH值和固定重金属离子的有益微生物，对它们的研究和利用有助于我们开发AMD污染的生物修复和治理策略。

矿山酸性环境作为极端环境的一种代表，其中的微生物群落具有较低的多样性，生物之间的相互关系相对简单，且它们在长期进化过程中逐渐形成了一些独特机制，以应对低pH值和高重金属含量等多种极端环境协迫。这样一个功能完善而又简单的微生物系统，被认为是研究微生物生态与进化的一个模式系统。通过揭示其中原核、真核微生物和病毒等的多样性和功能特征，有助于我们从整体上了解群落的各个组成部分的(协同)进化历史以及它们之间的相互作用。另外，AMD环境跟地球形成早期的条件极为相似，可以帮助我们了解生命早期的行为方式。因此，矿山酸性环境研究具有重要的理论研究价值。

虽然面临多种环境胁迫，但与其他生境的微生物群落一样，矿山酸性环境中有不同功能类群的微生物，它们不仅驱动主要的生物地球化学循环过程，而且生物多样性对AMD生态系统的功能和稳定性至关重要。在过去的几十年中，基于微生物分离培养、SSU rRNA/ITS分子标记基因测序和宏基因组分析等技术，我们对矿山酸性环境中的微生物种类和多样性有了较深刻的认识。但其中相比于细菌和古菌原核生物的研究，关于真菌的研究则很少。同原核生物一样，矿山酸性环境中真菌数量很多，但是种类很少。

矿山酸性环境中获得真菌纯培养最多的研究案例是研究者在美国俄亥俄州和弗吉尼亚州的AMD水体和附近的酸性土壤中分离到189种真菌，包括酵母型和丝状真菌。诸如假丝酵母属(Candida)、红酵母属(Rhodotorula)、毛孢子菌属(Trichosporon)的真菌常常从AMD水体中分离到。