[发明专利]一种美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法

权利要求书

1.一种美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述代谢产物包括5-羟基吲哚啉-2-酮、6-羟基-3,4-二氢-1H-2-喹啉酮、8-羟基-2-喹啉酮、羟吲哚、8-羟基-3,4-二氢-2-喹啉酮、8-羟基-2-喹啉酸；所述检测方法为超高效液相色谱法，色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相A为0.08～0.12％(v/v)甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱程序为：0～5min，流动相A 98％～93％；5～9min，流动相A 93％～90％；9～19min，流动相A 90％～78％；19～20min，流动相A 78％～98％；

流速0.3～0.35mL/min；

柱温40～60℃；

检测波长252～256nm。

2.根据权利要求1所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述流动相A为0.10％(v/v)甲酸水溶液。

3.根据权利要求1所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述流速为0.3mL/min；和/或

所述柱温为50℃；和/或

所述检测波长为254nm。

4.根据权利要求1～3任一项所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下操作：

以甲醇水溶液为溶剂，配制所述代谢产物的混合对照品溶液；在所述色谱条件下，用超高效液相色谱法对所述混合对照品溶液进行检测，根据所得峰面积建立各所述代谢产物的浓度–峰面积线性回归方程；

以甲醇水溶液为溶剂，将美洲大蠊粪便制成供试品溶液；在所述色谱条件下，用所述超高效液相色谱法对所述供试品溶液进行检测，将得到的峰面积代入所述浓度–峰面积线性回归方程，计算所述供试品溶液中所述代谢产物的含量。

5.根据权利要求4所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，配制所述混合对照品溶液的所述甲醇水溶液中甲醇的体积百分浓度为30～70％。

6.根据权利要求5所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述甲醇水溶液中含有0～1％(v/v)甲酸。

7.根据权利要求4所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制方法为：将所述美洲大蠊粪便粉碎，置于相当于所述美洲大蠊粪便重量20～100倍的50～70％(v/v)甲醇水溶液中，超声处理30～50min，过滤，滤液用水稀释至2～3倍。

8.根据权利要求7所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述甲醇水溶液中含有0～1％(v/v)甲酸；和/或

所述水中含有0～1％(v/v)甲酸。

9.根据权利要求7所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述超声的功率为540W，频率为35kHz。

10.根据权利要求7所述的美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，所述配制方法还包括在超声处理前用14000rpm离心10min，取上清液。