[发明专利]血清赖氨酸氧化酶作为肾间质纤维化的分层诊断性生物标志物

说明书

本发明涉及血清赖氨酸氧化酶作为肾间质纤维化的分层诊断性生物标志物。本发明首次证实血清赖氨酸氧化酶与肾间质纤维化相关且呈正相关，赖氨酸氧化酶可作为肾脏间质纤维化的无创分层诊断性生物标志物，且具备准确度高的优势。

技术领域

本发明涉及临床疾病诊断技术领域，具体地说，涉及血清赖氨酸氧化酶为肾间质纤维化的分层诊断性生物标志物。

背景技术

肾间质纤维化是各种慢性肾脏疾病发展为终末期肾病的共同病理特征，表现为细胞外基质(extracellular matrix，ECM)逐渐增多且发生过度交联。肾间质纤维化的范围和程度与肾功能减退具有高度相关性，但分子机制目前尚未阐明。

赖氨酸氧化酶(lysyl oxidase，LOX)是参与ECM交联的关键酶，最主要的功能是促进胶原和弹性蛋白发生交联，其交联机制如下：胶原和弹性蛋白富含赖氨酸，LOX使其赖氨酸残基ε-氨基发生氧化脱氨，产生AAS，通过Schiff’s碱或2个AAS相互作用形成分子间的醛醇缩合反应，使分子内和分子间交联，进而将胶原和弹性蛋白的可溶性单体转变为不溶性纤维，形成稳定的胶原纤维和纤维组织，使其具有强大的弹性与韧性，并能抵抗非特异性蛋白水解酶引起的弹性蛋白分解和胶原溶解。

目前有研究表明LOX与肝纤维化、心肌纤维化、肺纤维化、肾间质纤维化和肿瘤等多种疾病存在关系。

《中国循环杂志》2017年8月第32卷刊出的论文“赖氨酸氧化酶:一个潜在的急性主动脉夹层诊断指标”，探索了血液中LOX表达与急性期主动脉夹层的关系，证实LOX随着主动脉夹层发病时间延长而逐渐升高，是急性主动脉夹持的一个潜在诊断指标。

《广东医学》2011年9月第32卷第18期刊出的论文“博来霉素致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶蛋白表达与活性的动态变化”，研究了博来霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型中赖氨酰氧化酶(LOX)蛋白表达的变化，以及该变化与其活性的关系和对胶原沉积的影响。具体使用Western blot技术检测大鼠肺纤维化模型肺组织中的LOX蛋白表达变化，图谱中46、50、32kD 3个条带分别代表LOX的前蛋白(prepro-LOX)、糖基化蛋白(glycosylatedproLOX)和成熟蛋白(LOX)。与对照组比较，preproLOX在BLM处理后9、14d明显上调；糖基化蛋白在第9天开始上调，并在第14天达到高峰；两个前体蛋白在28d后恢复到基线水平；BLM对32kD LOX表达量影响较轻。

兰州大学2014年博士论文“X线诱导心肌成纤维细胞促纤维化损伤及黄芪注射液对其干预的实验研究”，观察了“X线对心肌成纤维细胞的促纤维化损伤效应”并构建纤维化损伤的细胞模型，在上述细胞模型上检测分析了X线对84个纤维化相关分子表达的影响，筛选出差异表达的基因，从分子水平初步探索放射促纤维化损伤的可能分子机制。结果表明PCR Array检测84个纤维化相关分子显示模型组(1Gy)和对照组(0Gy)相比有44个基因差异表达，30个基因表达上调，14个基因表达下调；细胞外基质两个基因Col-1A2和Col-3A1表达均上调；重构酶基因中MMP14、MMP3、MMP8、Plau(uPA)、Serpinala(al-antitrypsin)表达上调，Lox、Plat、Serpinel、TIMP1表达下调。

综上，可见LOX与疾病的关系非常复杂。目前未见血清赖氨酸氧化酶作为肾间质纤维化的分层诊断性生物标志物的报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种肾间质纤维化的分层诊断性生物标志物。

第一方面，本发明提供了血清赖氨酸氧化酶作为生物标志物在制备肾间质纤维化的分层诊断试剂或试剂盒中的应用。

作为一种优选实施方式，所述肾间质纤维化的分层诊断试剂或试剂盒其检测样品为血清。