[发明专利]一种类囊体蛋白质的提取方法在审
| 申请号: | 202010031448.5 | 申请日: | 2020-01-13 |
| 公开(公告)号: | CN111196836A | 公开(公告)日: | 2020-05-26 |
| 发明(设计)人: | 刘小敏;王璐璐;高宏波 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
| 主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14 |
| 代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
| 地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 种类 蛋白质 提取 方法 | ||
1.一种类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
1)将叶片剪碎放入研磨缓冲液GB中,然后进行破碎;
2)分离破碎的叶片细胞中的叶绿体,获得纯度高、形态完整的叶绿体;
3)将需要进行组分分离的样品标注好,然后进行离心;
4)用含有蔗糖的1×TE buffer重悬用于组分分离的样品后,裂解叶绿体;
5)通过离心,把上清和沉淀分开,沉淀即为类囊体蛋白质。
2.如权利要求1所述的类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:所述步骤1)中采用榨汁机进行破碎。
3.如权利要求2所述的类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:所述步骤2)中,采用percoll密度梯度法分离破碎的叶片细胞中的叶绿体。
4.如权利要求1所述的类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:所述步骤3)中离心采用离心机进行,所述离心机在使用前,将离心机温度调到4℃进行预冷。
5.如权利要求1所述的类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:所述步骤4)中采用超低温反复冻融方法裂解叶绿体。
6.如权利要求1~5中任一项所述的类囊体蛋白质的提取方法,其特征在于:还包括将所述类囊体蛋白质与上清蛋白质样品采用免疫印迹的方法进行检测。
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