[发明专利]卷枝毛霉MF-8及其提高土茯苓中花旗松素含量的应用

说明书

本发明公开了一种卷枝毛霉MF‑8及其提高土茯苓中花旗松素含量的应用，将卷枝毛霉MF‑8经产酶培养的发酵液过滤，取滤液为粗酶液，加入经粉碎的土茯苓粉，在30‑35℃的振荡条下转化反应24‑36h，过滤除去粗酶液，滤饼经烘干，即得富含花旗松素的土茯苓。本发明筛选的卷枝毛霉MF‑8使土茯苓中的花旗松素含量提高幅度大，最高可达28.1倍，含量由原来的0.247mg/g提高到7.19mg/g；本发明具有专一性好，产物得率高，生物催化剂的成本低的优势，实现土茯苓中药效成分原位转化。

(一)技术领域

本发明属于生物化工技术领域，具体涉及一种采用生物转化法提高土茯苓中花旗松素含量的方法。

(二)背景技术

花旗松素(taxifolin)又名黄杉素、二氢槲皮素、紫杉叶素，分子式为C₁₅H₁₂O₇，分子量为304.25，CAS号为480-18-2，化学名为3,5,7,3',4'–五羟基黄烷酮(3,5,7,3',4'-pentahydroxy flavanone)结构式见图1。

研究表明，花旗松素在人体中具有多种活性，如选择性免疫抑制、抗炎、镇痛、抗菌、降血糖、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等。花旗松素是食品工业的一种新的抗氧化剂，它的抗氧化能力可以与许多天然及合成的抗氧化剂相媲美，大剂量使用没有发现它有毒性反应，也没有实验发现它对胎儿有致畸、致过敏和致突变作用，可用作保健品或食品添加剂。2017年2月14日，欧盟食品安全局就落叶松提取物(花旗松素) 作为新资源食品发布意见，批准富含花旗松素的落叶松提取物用作非酒精饮料、酸奶和巧克力糖果等的添加剂。

目前，天然花旗松素只在紫杉、黄杉、落叶松中有发现，纹母树、野黑樱中也有极少量存在。因紫杉和黄杉已列入全球濒危树种禁止采伐，而落叶松只分布在俄罗斯西伯利亚东部、蒙古国东北部、中国东北地区和朝鲜，且生长周期较长，所以，用于提取生产花旗松素的资源极为稀少和匮乏。而它的糖苷，包括落新妇苷(astilbin， CAS号29838-67-3)、新落新妇苷(neoastilbin，CAS号54081-47-9)、异落新妇苷 (isoastilbin，CAS号54081-48-0)、新异落新妇苷(neoisoastilbin，CAS号54141-72-9) 在自然界广泛存在，特别是在土茯苓、紫荆花中含量较高，如《2015年药典》规定中药材土茯苓中落新妇苷的含量不得低于0.45％。所以，以落新妇苷为原料，水解切除二糖残基而转化为花旗松素，则是一条可行的生产方法。

采用微生物发酵的含糖苷酶的粗酶液处理土茯苓，因粗酶液中含多种类型的糖苷酶，可以将土茯苓中所含的落新妇苷及其异构体都转化成花旗松素，其含量可大幅度提高，而且微生物发酵产生的多糖水解酶对植物组织结构的纤维素和半纤维素降解，使土茯苓植物组织疏松，从而有利于花旗松素的释放。经过转化处理的土茯苓，既可作为中药饮片应用于中药方剂；也可以作为花旗松素提取的原料，提取率将大幅度提高。

(三)发明内容

本发明目的是提供一株产糖苷酶的微生物新菌株—卷枝毛霉(Mucorcircinelloides) MF-8菌株，及其提高土茯苓中花旗松素含量的应用。经转化处理的土茯苓中，花旗松素的含量显著提高，可达7.19mg/g，工艺具有成本低、流程简单、转化率高等优点。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一株新菌株—卷枝毛霉(Mucor circinelloides)MF-8，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:60920，保藏日期2019年12月18日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；邮编：510070。