[发明专利]利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法和应用

说明书

本发明公开了利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法和应用，涉及生物技术领域。本发明公开的利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法包括利用基因操作技术使Tmem30a基因在目标动物的足细胞中不表达或表达受到抑制。构建方法可以构建出肾小球疾病模型，该模型具有肾小球疾病的特征，可以为肾小球疾病的研究和治疗以及药物筛选提供模型保障。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法和应用。

背景技术

肾脏病是一种严重危害人类健康的疾病，主要包括不同类型的肾炎和急性肾衰竭等。有资料显示，我国人群中慢性肾脏病的发生率为11-13％。

肾脏病的表型有：按解剖结构来分，肾脏病分为肾小球疾病、肾小管疾病、肾间质疾病和肾血管疾病；按发病机制分为原发性肾脏疾病、继发性肾脏疾病、遗传性肾脏疾病和感染性肾脏疾病；按病程可分为急性肾脏疾病和慢性肾脏疾病。在我国，肾小球疾病是引起肾衰竭的最主要原因。肾小球疾病共同的表现为(可不同时出现)：蛋白尿、水肿、血尿、尿量减少或无尿、肾功能正常或下降。肾小球疾病是一组疾病，病因各不相同，可能与遗传、免疫、代谢、感染和肿瘤等因素相关。不同种类肾小球疾病的治疗方法也不尽相同，但目的都是防止和延缓病程进展，改善临床症状及防止并发症(包括高血压脑病、心力衰竭和尿毒症等)。临床上对患者的治疗包括一般治疗，即多休息、限盐、限水和限制食物中的蛋白；强化治疗，例如糖皮质激素和抗血小板药物等；替代治疗，血尿透析甚至肾脏移植。但是，现有的肾小球疾病治疗方法以经验为主，通常效果不理想、预后差并且难以避免药物的对肝肾的毒副作用。

为了更好地研究和治疗肾脏病，以及筛选出可有效治疗肾脏病的药物，本领域需要能够模拟出肾脏病特征的疾病模型，而目前，缺乏这样疾病模型。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法和应用。本发明提供的构建方法可以构建出具有肾小球疾病的动物模型，该模型具有肾小球疾病的特征，可以为肾小球疾病甚至是肾脏病的研究和治疗以及药物筛选提供模型保障。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种利用基因操作技术构建肾小球疾病模型的方法，所述肾小球疾病模型具有肾小球硬化表型，所述构建方法包括：利用基因操作技术使Tmem30a基因在目标动物的足细胞中不表达或表达受到抑制。

本发明的研究首次发现，在足细胞中敲除Tmem30a基因，可使动物体表型出肾脏病的典型特征即肾小球硬化。因此，通过利用基因操作技术使Tmem30a基因在目标动物的足细胞中不表达或表达受到抑制，构建出具有肾小球硬化表型的肾脏病动物模型，为本领域研究人员深入研究肾脏病尤其是具有肾小球硬化表型的肾脏病的发病机制，以及筛选出可有效治疗肾脏病的药物提供的模型基础。

在本发明揭示了敲除了足细胞中Tmem30a基因可导致肾小球硬化的基础上，本领域技术人员容易想到采用任何适宜的基因操作技术操作Tmem30a基因使其在目标动物的足细胞不表达或表达受到抑制即不发挥正常的功能。基因操作技术可以是本领域已知的如基因编辑技术、基因敲除技术或RNA干扰技术等技术。在已知目标动物的Tmem30a基因序列的基础上，本领域技术人员可以利用基因编辑技术、基因敲除技术或RNA干扰技术对Tmem30a基因操作，使其在足细胞不发挥正常的功能，以得到肾脏病动物模型。

在可选的实施方式中，所述基因操作技术选自基因编辑技术、基因敲除技术和RNA干扰技术中的任意一种或几种的组合。

在可选的实施方式中，所述基因编辑技术选自CRISPR/Cas9技术、ZFN技术和TALEN技术中的任意一种或几种的组合。

在可选的实施方式中，所述基因操作技术为Cre-loxp基因敲除技术。