[发明专利]一种基于可溶性疏水标记载体的液相法制备索马鲁肽的方法

说明书

本发明提供一种基于可溶性载体的液相法制备索马鲁肽的方法，解决了现有的固相法制备索马鲁肽等长链多肽中方法繁琐、难以纯化、收率较低的技术问题。本发明首先将索马鲁肽划分为六个片段，通过逐个偶联的方法以亲脂疏水的2，4‑二(二十二烷氧基)苯甲醇为载体制备这六个片段，本发明有别于传统的固相法，反应中可以通过TLC或液相法简单地监测反应是否完全进行，有效地避免了缺失或增添单个氨基酸残基杂质的产生，非常有效地降低了纯化难度并提高了原料的利用率，符合现今推行的绿色化学理念。本发明也可以广泛地应用于其他多肽药物的制备技术领域。

技术领域

本发明属于多肽药物制备技术领域，具体一种基于可溶性疏水标记载体的液相法制备索马鲁肽的方法。

背景技术

本发明背景技术中公开的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

II型糖尿病是目前危害人类健康的一大顽疾，其主要特点是人体自身可以分泌胰岛素，但由于胰岛素抵抗使得人体细胞很难或无法对胰岛素产生反应，是胰岛素的效果显著下降，导致血糖升高。目前针对II型糖尿病的药物主要有盐酸二甲双胍、磺酰脲类以及噻唑烷二酮类等一系列降糖药。但是人类对这些药物的耐受性有限，长期持续加大给药剂量可能会导致耐药以及潜在的心血管风险，导致治疗不能达到预期的目标。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂是近年来针对II型糖尿病药物的研究热点，其中索马鲁肽(semaglutide)是胰高血糖素样肽-1的衍生物之一，与2017年12月被FDA在美国批准上市。对先导化合物胰高血糖素样肽-1的氨基酸残基替换以及结构修饰使得索马鲁肽在体内具有更好的白蛋白亲和力以及不易被DDP-4酶代谢而失活，显著延长了类胰岛素药物通常很短的半衰期。索马鲁肽在人体内的半衰期高达惊人的165小时，这使得它成为了目前唯一一个可以一周给药一次的长效胰高血糖素样肽-1激动剂。此外，索马鲁肽的安全性良好，不会产生其他类胰岛素药物常见的重复用药导致的低血糖休克风险，且兼具减肥功效。索马鲁肽是目前用于治疗II型糖尿病最具希望的药物。

索马鲁肽的结构中是主链含有31个氨基酸残基，侧链含有4个类氨基酸单位的支链多肽，其具体结构以及氨基酸序列如下所示：

目前已有的制备方法专利如下所述，无论是CN106928343A、CN104356224A、CN101133082A、CN106478806A和CN105753964A采用的Fmoc法固相逐个偶联制备索马鲁肽，还是CN106749613A与CN109456401A采用的固相片段缩合方法制备索马鲁肽，其中涉及的主要技术均为固相法制备多肽。众所周知，固相法存在以下的问题：1.所涉及的反应均为非均相反应，其反应时间较长且不易进行完全；投料量过量较大使得其对反应物的浪费较多；并且反应容易出现副反应等。2.固相法受固相树脂载体的取代值的限制，总收率较低；且中间产生的缺失或增添单个氨基酸残基的副产物较多，这使得杂质性质与产物接近，难以纯化。综上两条可以得出结论，固相法的原料消耗大但产率与纯度却相对较低，导致成本较高，尤其是在索马鲁肽其中一部分原料较为昂贵的情况下，这种对原料的浪费会体现在高昂的成本上。且固相法逐个偶联会导致难分离的杂质出现，降低了纯化效率甚至有可能会影响产物的品质。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明提供基于可溶性疏水标记载体的液相多肽制备方法，有效地避免了缺失或增添单个氨基酸残基杂质的产生，非常有效地降低了纯化难度并提高了原料的利用率，符合现今推行的绿色化学理念。同时，本发明也可以广泛地应用于其他多肽药物的制备技术领域。

为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供一种基于可溶性疏水标记载体的液相法制备索马鲁肽的方法，包含以下步骤：

在tag载体上依次偶联氨基酸制备6个碳末端连有tag载体的全保护片段；其中6个碳末端连有tag载体的全保护片段的结构如下：