[发明专利]牛冠状病毒HE基因重组株及其制备的灭活疫苗和应用

权利要求书

1.一株牛冠状病毒HE基因重组株，命名为BCoV-LNA1株，其特征在于：该菌株于2019年12月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，CCTCC NO:V202016，分类命名：牛冠状病毒BCoV-LNA1-SWUN7901。

2.根据权利要求1所述的一株牛冠状病毒HE基因重组株，其特征在于：所述BCoV-LNA1株的病毒含量≥10^7.75TCID₅₀/mL。

3.权利要求1或2所述的一株牛冠状病毒HE基因重组株在制备牛冠状病毒疫苗中的应用。

4.权利要求1或2所述的一株牛冠状病毒HE基因重组株制备的牛冠状病毒疫苗。

5.根据权利要求4所述的牛冠状病毒疫苗，其特征在于：所述牛冠状病毒疫苗包括：预防上有效量的灭活的所述牛冠状病毒HE基因重组株BCoV-LNA1株和药学上可接受的佐剂。

6.权利要求4或5所述的牛冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)增殖所述牛冠状病毒HE基因重组株BCoV-LNA1株，收获病毒液，离心，取上清液；

(2)将病毒上清液加入灭活剂进行灭活；

(3)将灭活的病毒上清液与佐剂混合，乳化，即得。

7.根据权利要求6所述的牛冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中采用Vero细胞增殖所述的牛冠状病毒HE基因重组株BCoV-LNA1株。

8.根据权利要求6所述的牛冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中灭活的控制参数为：37℃灭活12h。

9.根据权利要求6或8所述的牛冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：所述灭活剂为终浓度为0.5％的β-丙内酯。

10.根据权利要求6所述的牛冠状病毒疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中灭活的病毒上清液与佐剂按照体积比1：1混合。