[发明专利]表达因子IX的慢病毒载体的用途

权利要求书

1.一种预防或治疗有需要的受试者中血友病的方法，所述方法包括向所述受试者给予有效剂量的慢病毒载体，所述慢病毒载体包含编码具有因子IX(FIX)活性的多肽的核苷酸序列，其中所述慢病毒载体被包装在过表达CD47的HEK293T细胞中，所述慢病毒载体包含比未修饰的HEK293T细胞(CRL-11268^TM)中产生的对照慢病毒载体更高水平的表面CD47蛋白表达，并且其中相对于诱导与所述慢病毒载体相同的FIX活性所需的对照慢病毒载体的对照剂量，所述有效剂量降低。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述对照慢病毒载体在所述对照慢病毒载体的表面上包含19个分子/μm²的CD47。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述慢病毒载体在所述慢病毒载体的表面上包含比在HEK293T细胞(CRL-11268^TM)中产生的所述对照慢病毒载体多至少约1.5倍、至少约2.0倍、至少约2.5倍、至少约3.0倍、至少约3.5倍、至少约4.0倍、至少约4.5倍、至少约5.0倍、至少约5.5倍、至少约6.0倍、至少约6.5倍、至少约7.0倍、至少约7.5倍、至少约8.0倍、至少约8.5倍、至少约9.0倍、至少约9.5倍、至少约10倍、至少约11倍、至少约12倍、至少约13倍、至少约14倍、至少约15倍、至少约20倍、至少约25倍、至少约30倍、至少约35倍、至少约40倍的CD47蛋白。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述有效剂量少于约5x10¹⁰转导单位/kg(TU/kg)、少于4x10¹⁰TU/kg、少于3x10¹⁰TU/kg、少于2x10¹⁰TU/kg、少于1x10¹⁰TU/kg、少于9x10⁹TU/kg、少于8x10⁹TU/kg、少于7x10⁹TU/kg、少于6x10⁹TU/kg、少于5x10⁹TU/kg、少于4x10⁹TU/kg、少于3x10⁹TU/kg、少于2x10⁹TU/kg、少于1x10⁹TU/kg、少于约9x10⁸TU/kg、或少于约8x10⁸TU/kg。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述受试者在所述给予后展现出一种或多种以下特性：

(a)相对于所述对照慢病毒载体，所述慢病毒载体的巨噬细胞转导减少；

(b)相对于所述对照慢病毒载体，对所述慢病毒载体的同种特异性免疫应答降低；

(c)在给予后至少3周，相对于正常FIX活性至少30％的FIX活性；

(d)所述慢病毒载体在肝、脾或肝和脾二者中的组织特异性表达；和

(e)(a)-(d)的任何组合。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述同种特异性免疫应答包括响应于所述慢病毒载体的细胞因子的释放。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述细胞因子选自MIP-1a、MIP-1b、MCP-1及其任何组合。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中相对于在给予所述对照慢病毒载体之后的MIP-1a表达，所述受试者在给予所述慢病毒载体之后展现出较低水平的MIP-1a表达。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中相对于在给予所述对照慢病毒载体之后的MIP-1b表达，所述受试者在给予所述慢病毒载体之后展现出较低水平的MIP-1b表达。