[发明专利]FLT3激动剂抗体及其用途

说明书

本文描述了抗FLT3激动性抗体。此类激动性抗体可用于树突状细胞的扩增和癌症的治疗。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年12月18日提交的美国临时专利申请号62/781,213的权益，将所述临时专利申请的全部通过引用以其整体并入本文。

背景技术

FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)(又称为CD135)是一种在造血干细胞、成熟树突状细胞(DC)和DC祖细胞上表达的III类受体酪氨酸激酶。经由其配体FLT3配体(FTL3L)进行的FLT3信号传导导致这些细胞的扩增和分化。这种受体的突变使细胞增殖与配体信号传导脱离，并且与病理赘生物、特别是急性髓性白血病(AML)相关。相反，经由外源可溶性FLT3L治疗对FLT3的激动目前处于实体瘤疗法的临床研究中，其中其DC扩增特性充当肽疫苗接种疗法的佐剂，并且与免疫肿瘤和放射疗法组合增强抗肿瘤免疫应答。然而，FLT3L疗法具有有限的药代动力学利用度和复杂的给药要求。

发明内容

本文描述了FLT3激动剂抗体的开发，所述FLT3激动剂抗体诱导DC及其祖细胞的扩增和分化，从而改善肿瘤抗原呈递，同时克服配体的有限生物利用度。这些抗体在治疗癌症的方法中是有用的。

本文所述的一方面包括一种结合FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段，其中所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段包含：可变区重链互补决定区1(VH-CDR1)，其包含SEQ ID NO:1(GFTFSNY)、2(NYGMA)或29(GFTFSNYGMA)中所示的氨基酸序列；可变区重链互补决定区2(VH-CDR2)，其包含SEQ ID NO:3(HSGGGD)或4(SIHSGGGDTYYRDSVKG)中所示的氨基酸序列；可变区重链互补决定区3(VH-CDR3)，其包含SEQ ID NO:5(GRTPTGYYFDH)中所示的氨基酸序列；可变区轻链互补决定区1(VL-CDR1)，其包含SEQ ID NO:6至10(RASEGIHXGLA)中任一个中所示的氨基酸序列；可变区轻链互补决定区2(VL-CDR2)，其包含SEQ ID NO:10(NANSLHS)中所示的氨基酸序列；以及可变区轻链互补决定区3(VL-CDR3)，其包含SEQ ID NO:11(QQYYDYPLT)中任一个中所示的氨基酸序列；其中X是任何氨基酸残基。在一些实施方案中，所述VL-CDR1包含选自以下的氨基酸序列：SEQ IDNO:7(RASEGIHDGLA)；SEQ ID NO:8(RASEGIHSGLA)；SEQ ID NO:9(RASEGIHTGLA)；和SEQ IDNO:10(RASEGIHLGLA)。在一些实施方案中，所述VL-CDR1包含SEQ ID NO:8(RASEGIHSGLA)中所示的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段包含：免疫球蛋白重链可变区(VH)序列，其包含与SEQ ID NO:15、17、19、21和23中任一个中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列；和免疫球蛋白轻链可变区(VL)序列，其包含与SEQ ID NO:16、18、20、22、24、25、26、27和28中任一个中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述免疫球蛋白重链可变区(VH)包含与SEQ ID NO:15中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列；并且所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)包含与SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述免疫球蛋白重链可变区(VH)包含与SEQ ID NO:15中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列；并且所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)包含与SEQ ID NO:26中所示的氨基酸序列至少约90％、95％、97％、98％或99％、或100％相同的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段是嵌合的或人源化的。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段是IgG抗体。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段包含一个或多个突变以降低所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段的一种或多种效应子功能。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段的重链恒定区包含IGg4重链恒定区，其包含选自以下的以下氨基酸修饰或修饰组中的任一个：根据EU编号系统的IgG4修饰的N434A、N434H、T307A/E380A/N434A、M252Y/S254T/T256E、433K/434F/436H、T250Q、T250F、M428L、M428F、T250Q/M428L、N434S、V308W、V308Y、V308F、M252Y/M428L、D259I/V308F、M428L/V308F、Q311V/N434S、T307Q/N434A、E258F/V427T、S228P、L235E、S228P/L235E/R409K、S228P/L235E、K370Q、K370E、G446缺失、K447缺失及其任何组合。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段包括Fab、F(ab)2、单结构域抗体或单链可变片段(scFv)。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段在与人外周血单核细胞和/或骨髓来源的细胞接触时增加树突状细胞或血液树突状细胞前体的量。在一些实施方案中，树突状细胞或血液树突状细胞前体的量增加的EC50小于约200皮摩尔(pM)。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段增加表达FLT3的细胞系中的STAT5表达。在一些实施方案中，表达FLT3的所述细胞系中STAT5表达增加的EC50等于或小于由人FLT3配体诱导的表达FLT3的细胞系中STAT5表达增加的EC50。在一些实施方案中，所述重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段包含免疫调节部分。在一些实施方案中，所述免疫调节部分是干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂。在一些实施方案中，本文描述了一种药物组合物，其包含本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于静脉内施用。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于皮下施用。在一些实施方案中，所述药物组合物被配制用于瘤内施用。在一些实施方案中，本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物用于在治疗癌症中使用。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物用于在治疗被诊断患有或怀疑患有癌症的个体的癌症中使用。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物用于在扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体中使用。在一些实施方案中，本文描述了一种在个体中扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体的方法，其包括将本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物施用至被诊断患有或怀疑患有癌症的个体。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。在一些实施方案中，本文描述了一种在患有肿瘤或癌症的个体中将树突状细胞或血液树突状细胞前体募集和/或扩增至肿瘤微环境的方法，其包括将有效量的本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物施用至患有所述肿瘤或癌症的所述个体。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。在一些实施方案中，本文描述了一种核酸，其编码本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段。在一些实施方案中，本文描述了一种细胞，其包含本文所述的核酸。在一些实施方案中，所述细胞是真核细胞。在一些实施方案中，所述细胞是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。在一些实施方案中，本文描述了一种制备癌症治疗剂的方法，其包括在培养基中在足以将本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段分泌到所述培养基中的条件下孵育本文所述的细胞。在一些实施方案中，制备癌症治疗剂的所述方法还包括使所述培养基经受至少一个纯化步骤。在一些实施方案中，本文描述了一种制备癌症治疗剂的方法，其包括将本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段与药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂混合。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在治疗癌症中的用途。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在治疗被诊断患有或怀疑患有癌症的个体的所述癌症中的用途。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体中的用途。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在个体中扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体中的用途。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在个体中将树突状细胞或血液树突状细胞前体募集至肿瘤微环境中的用途。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段和药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂在制造用于治疗癌症的药物中的用途。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在制造用于治疗癌症的药物中的用途。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在制造用于治疗被诊断患有或怀疑患有癌症的个体的药物中的用途。在一些实施方案中，所述癌症包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、肾癌、头颈癌、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、前列腺癌或肺癌。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在制造用于扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体的药物中的用途。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在制造用于在被诊断患有或怀疑患有癌症的个体中扩增或分化树突状细胞或血液树突状细胞前体群体的药物中的用途。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。在一些实施方案中，本文描述了本文所述的重组抗体或所述重组抗体的抗原结合片段或本文所述的药物组合物在制造用于在被诊断患有或怀疑患有癌症的个体中将树突状细胞或血液树突状细胞前体募集至肿瘤微环境的药物中的用途。在一些实施方案中，所述树突状细胞或血液树突状细胞前体包括常规树突状细胞亚群cDC1、常规树突状细胞亚群cDC2、浆细胞样树突状细胞或其任何组合。