[发明专利]非动物来源培养基上的细菌生长

说明书

本发明涉及用于在不含动物来源的物质诸如血液的培养基中培养微生物的工具、组合物和方法，并且尤其涉及无肉培养基的组合物。

对相关申请的引用

本申请要求在2018年12月6日提交的美国临时申请号62/775,987的优先权，其全部内容在此通过引用并入。

背景

1. 发明领域

本发明涉及用于在不含动物来源的物质诸如血液的培养基中培养微生物的工具、组合物和方法，并且尤其涉及无肉培养基的组合物。

2. 背景描述

为了各种原因，包括但不限于为了诊断或鉴定目的，为了生长和繁殖(例如，可能存在的细胞或细胞内的感染物、诸如病毒或细菌的生长和繁殖)，和为了克隆，将来自环境的微生物、受感染的组织、源自组织或基因工程改造的生物样本在实验室环境中培养和维持。细胞培养包括在无菌条件下在已知组成的营养培养基上维持或生长细胞、组织或器官的一系列技术。组织培养被广泛用于在称为微繁殖的方法中产生克隆。经常培养微生物，诸如细菌和基因修饰的微生物，以鉴定特定的菌株或血清型，或用于测试对各种化合物、诸如抗微生物剂(例如抗生素)的敏感性或抗性。

在所有情况下，小心地控制和监测微生物的生长，以确保可复制性并获得有意义的结果。生长培养基可以是液体或固体，其中固体培养基呈或半固体、诸如琼脂的形式。每种培养基(无论呈何种形式)都必须含有特定微生物所需的必需营养素。与非必需营养素区分开来的必需营养素是细胞无法自行制造的那些化学化合物，且因此必须直接从其环境获取。对于液体培养基，包括了各种类型的动物血清(例如胎牛血清、马血清、山羊血清)以提供那些必需品，并且对于固体培养基，基本组分由动物提取物(例如牛肉提取物)提供。动物血清和提取物是昂贵的，并且其成分从未精确一致。然而，许多不同类型的细胞的繁殖需要动物产品(诸如血液)用于生长。使用非动物来源的生长培养基会降低成本，并且有助于使测试和实验标准化。

发明概述

本发明克服了与当前策略和设计相关的问题和缺点，并提供了不需要动物产品的微生物维持和繁殖的培养基的新装置和方法。

本发明的一个实施方案涉及组合物，其包含一种或多种盐；镁盐；钙盐；大豆粕；多糖；至少两种氨基酸；酵母提取物；亚铁盐或铁盐；和丙酮酸盐。优选地，所述一种或多种盐包括氯化钠。优选地，所述镁盐包括氯化镁或硫酸镁。优选地，所述钙盐包括氯化钙或硫酸钙。优选地，所述大豆粕包括大豆粕的酶促水解物。优选地，所述至少两种氨基酸包括半胱氨酸和硫胺素。优选地，所述糖包括葡萄糖。优选地，所述亚铁盐或铁盐包括硫酸亚铁、柠檬酸铁或两者。优选地，所述组合物包含水溶液或干粉。优选地，所述水溶液包含约1-5 g/L的一种或多种盐；约0.1至2.0 g/L的镁盐；约0.001至0.1 g/L的钙盐；约2-10 g/L的大豆粕；约5-20 g/L的多糖；约0.001至0.1 g/L的至少两种氨基酸；约1-10 g/L的酵母提取物；约0.0001-0.001%的亚铁盐或铁盐；和约0.01-1.0%的丙酮酸盐。

本发明的另一种组合物包含一种或多种盐；大豆粕；糖；酵母提取物；植物蛋白水解物，亚铁盐或铁盐；和丙酮酸盐。优选地，所述一种或多种盐包括氯化钠。优选地，所述大豆粕包括大豆粕的酶促水解物。优选地，所述糖包括葡萄糖。优选地，所述酵母提取物包括植物酵母提取物。优选地，所述植物蛋白水解物包括atholate。优选地，所述亚铁盐或铁盐包括硫酸亚铁或柠檬酸铁。优选地，大豆粕的酶促水解物的浓度为约0.5-10%，所述多糖的浓度为约0.5-5%，所述植物酵母提取物的浓度为约0.1-10%，所述植物蛋白水解物的浓度为约1-10%，所述亚铁盐或铁盐的浓度为约0.001-0.01%，且所述丙酮酸盐的浓度为约0.01-1.0%。优选地，本公开的组合物是水溶液、干粉或半固体、诸如琼脂。

本发明的另一个实施方案涉及用于培养微生物的方法，其包括：获得微生物的样品；和使所述微生物与包含本发明组合物的培养基接触。优选地，所述微生物包括肺炎链球菌。